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哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基的種類

2018-01-10 10:17來(lái)源:威正翔禹生物

哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基是供哺乳動(dòng)物細(xì)胞(包括原代細(xì)胞和細(xì)胞系)生長(zhǎng)、增殖或者分化的人工配制的營(yíng)養(yǎng)液,一般可分為天然培養(yǎng)基和人工合成培養(yǎng)基。

在20世紀(jì)早期,從事細(xì)胞培養(yǎng)用的培養(yǎng)液都是天然培養(yǎng)基,如用淋巴液和血漿等。到20世紀(jì)中期,隨著一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的化學(xué)合成和工業(yè)發(fā)展,細(xì)胞生物學(xué)家開(kāi)發(fā)出人工合成的培養(yǎng)基配方。一開(kāi)始即要尋找細(xì)胞生長(zhǎng)最低需要滿足哪些營(yíng)養(yǎng)。后來(lái)隨著不同細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需求,又增加了其他的營(yíng)養(yǎng)成分,但都是要配合牛血清(最常用胎牛血清)一起使用。原因在于經(jīng)典的合成培養(yǎng)基都不含蛋白質(zhì)、脂類和生長(zhǎng)因子以及其他某些必要的營(yíng)養(yǎng)成分,因此需要胎牛血清來(lái)額外提供這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。通常胎牛血清的量是加5%-20%。

那么有哪些經(jīng)典合成的培養(yǎng)基呢?有如下幾種:

1、BME(Basal Medium Eagle): 它是由美國(guó)生理學(xué)家Harry Eagle開(kāi)發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。它最初是根據(jù)Hela細(xì)胞和小鼠的成纖維L細(xì)胞所需的最低營(yíng)養(yǎng)而設(shè)計(jì)的。它包含無(wú)機(jī)鹽、氨基酸和維生素等。后來(lái)許多培養(yǎng)基在它基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)而成。

2、MEM(Minimum Essential Medium Eagle): MEM培養(yǎng)基也是Harry Eagle在BME配方基礎(chǔ)上改良而成。它比BME含有更高濃度的氨基酸,可同時(shí)用于貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞,例如HeLa、BHK-21、293、MCF-7細(xì)胞等。

3、DMEM:即意大利生理學(xué)家Dulbecco改良的Engle培養(yǎng)基。DMEM最常用,能支持很多貼壁細(xì)胞生長(zhǎng),包括原代的成纖維細(xì)胞、神經(jīng)元、HUVECs、平滑肌細(xì)胞以及一些細(xì)胞系如Hela(常用于癌癥和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究)、293(常用于外源蛋白表達(dá))、Cos-7(常用于轉(zhuǎn)染研究)等。

4、GMEM(Glasgow's Minimum Essential Medium):是對(duì)BME培養(yǎng)基的改良型,添加有10%的胰蛋白?磷酸鹽以及2倍濃度的氨基酸和維生素,適合培養(yǎng)BHK細(xì)胞等。

5、MEMα:是MEM培養(yǎng)基的改良型,包括非必需氨基酸、丙酮酸鈉、硫辛酸、維生素B12、生物素和抗壞血酸。可作為DG44和其他DHFR陰性細(xì)胞的選擇培養(yǎng)基。也可用于培養(yǎng)角質(zhì)細(xì)胞、原代大鼠星形細(xì)胞和人黑色素瘤細(xì)胞。

6、DMEM/F12: 它將 DMEM 的高濃度葡萄糖、氨基酸及維生素與 F-12的廣泛組分結(jié)合在一起,營(yíng)養(yǎng)更豐富,可用于支持很多種類的哺乳動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng),包括 MDCK、膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、人內(nèi)皮細(xì)胞及小鼠成纖維細(xì)胞。

7、RPMI-1640:主要用于培養(yǎng)懸浮細(xì)胞。它含有還原劑谷胱甘肽和高濃度維生素(如肌醇、膽堿),還包括生物素、維生素B12等MEM、DMEM沒(méi)有包含的成分。

8、M199:1950年由Morgan, MortonParker開(kāi)發(fā)而成,最初用于原代雞胚成纖維細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)研究。現(xiàn)在常用于非轉(zhuǎn)化細(xì)胞和原代移植上皮細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗和病毒的生產(chǎn)。

9、IMDM(Iscove's Modified Dulbecco's Medium):是DMEM的改良型,添加有、氨基酸和維生素,但缺乏鐵。用于快速生長(zhǎng)的高密度細(xì)胞,例如 Jurkat, COS-7和巨噬細(xì)胞。

10、Leibovitz's L-15:用于培養(yǎng)無(wú)CO2環(huán)境的細(xì)胞。原先的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)被游離堿性氨基酸、磷酸鹽和高濃度的半乳糖和丙酮酸鈉所替代。無(wú)須經(jīng)常更換培養(yǎng)基。常用于病毒學(xué)診斷等密閉培養(yǎng)細(xì)胞的場(chǎng)合。

11、McCoy's 5A:由Thomas McCoy最早開(kāi)發(fā)該配方。包含有谷胱甘肽、蛋白胨和高濃度葡萄糖。常用于培養(yǎng)來(lái)自正常骨髓,皮膚,牙齦,睪丸,小鼠腎,網(wǎng)膜,腎上腺,肺,脾,大鼠胚胎等的原代細(xì)胞。

HiMedia作為世界知名培養(yǎng)基生產(chǎn)商,提供有廣泛的細(xì)胞培養(yǎng)基和各種緩沖液,產(chǎn)品種類眾多,質(zhì)量可靠。歡迎來(lái)電咨詢選購(gòu)、咨詢熱線:400-166-8600。

關(guān)于培養(yǎng)基,今天我們就簡(jiǎn)要介紹到這里。想要呵護(hù)“嬌嫩”細(xì)胞,培養(yǎng)基也很關(guān)鍵喔!