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科學家終于找到不依賴病毒的T細胞工程化方法

2018-07-18 11:03來源：醫藥資訊

2018年7月11日《Nature》雜志上報告了一種非病毒的方法，它用一種強大的分子“切割和粘貼”系統，重寫人類T細胞中的基因組序列。它依賴于電穿孔，是一種將電場施加到細胞上使其膜暫時更具滲透性的過程。加州大學舊金山分校(UCSF)的研究人員發現：當一定數量的T細胞，DNA和CRISPR“剪刀”混合在一起然后暴露在適當的電場中時，T細胞將會在吸收這些元素，精確地將特定的基因序列整合到基因組中的CRISPR編程位點。




經過近一年的反復試驗，研究人員確定了T細胞群，DNA量和CRISPR豐度的比例，結合使用適當參數傳遞的電場，可以有效且準確地對T細胞基因組進行編輯。為了驗證這些發現，Roth指示CRISPR用綠色熒光蛋白(GFP)標記一系列不同的T細胞蛋白，結果表明：這種操作是高度特異性的，脫靶的幾率非常低。


實驗結果表明：在不使用病毒的情況下，研究人員能夠生成大量經過重新編程的CRISPR工程化細胞，表達出新的T細胞受體。當轉移到植入人黑素瘤腫瘤的小鼠中時，工程化的人T細胞進入腫瘤部位并顯示出抗癌活性。