幾種分離空腸彎曲菌的方法介紹

彎曲菌（Campylobacterspp.）是導致人類食源性腹瀉的主要病原菌之一，其感染已成為全球范圍內引起細菌性腸胃炎的主要病因。目前，彎曲菌屬已被鑒定有26個種。

空腸彎曲菌和結腸彎曲菌是彎曲菌屬中引起大多數的人類疾病的主要菌種，由空腸彎曲菌引起超過90%人類疾病感染，除急性腸胃炎，其感染還可并發嚴重的格林-巴利綜合征，可導致人呼吸肌麻痹而死亡。剩余大多數人類疾病由結腸彎曲菌引起。

如何高效的檢測出空腸彎曲菌，成為了檢測人員關心的重要問題。本文締一生物為您介紹幾種空腸彎曲菌檢測方法。

傳統檢測方法

根據選擇性培養基生長特征、鏡檢和諸多生化指標來判別。根據 ISO10272-2017 方法和國標 GB 4789.9-2014 方法，空腸彎曲菌是能水解馬尿酸鹽的彎曲菌，并且是區分空腸彎曲菌和結腸彎曲菌的生化指標。一般步驟分樣品處理、增菌與預增菌、分離、鑒定四個步驟，菌種分離是實驗成功的關鍵問題。

分離空腸彎曲菌締一生物為您推薦使用HiMedia公司（國際知名微生物公司）彎曲菌顯色培養基（貨號：M2020）進行分離。常見的空腸彎曲菌分離平板為mCCDA，HiMedia在mCCDA平板上進行改良，可支持彎曲桿菌的豐饒生長，在此培養基中呈現淺紫至紫色的菌落，比通常mCCDA平板容易分離，可對食品和臨床樣品對彎曲桿菌進行選擇性分離和鑒定。

傳統檢測方法具有儀器、設備要求不高，檢測成本低等優點，目前仍是質檢部門檢測彎曲菌的主要檢測方法。

免疫傳感器方法

生物傳感器是對生物物質敏感并能將其濃度轉換為電信號等進行檢測的儀器。它是由固定化的生物敏感材料作識別元件（包括酶、抗原、抗體、微生物、細胞、組織、核酸等生物活性物質）、信號轉換器（如氧電極、光敏管、場效應管、壓電晶體等）及信號放大裝置構成的分析工具或系統組成。待測物與識別元件發生作用后，所得產物（光、熱等）通過信號轉換器轉變為可以輸出的電信號、光信號等，從而達到分析檢測物的目的。

基于生物傳感器的方法自動化程度高，對人員的要求不高，可實現對樣品的現場實時無損檢測，但在食品基質中的檢測效果一般。

基于質譜的方法

基質輔助激光解吸電離飛行質譜(MALDI-TOF-MS)是近年來發展起來的一種新型的用于微生物鑒定和分型的技術。其原理是用激光照射樣品與基質形成的共結晶薄膜，基質從激光中吸收能量，樣品解吸附，基質-樣品之間發生電荷轉移使得樣品分子電離，電離的樣品在電場作用下飛過真空飛行管，通過離子的質量電荷之比（M/Z）與離子的飛行時間成正比來分析離子，并測得樣品分子的分子量。不同的細菌經過 MALDI-TOF-MS 檢測可以形成特異性的指紋圖譜，將待測菌的指紋圖譜與已有的質譜圖譜庫比較，即可確定細菌種屬。

基于質譜的方法雖然快速可靠，但主要應用于對純菌株的鑒定分型，要達到直接從樣品中分析彎曲菌菌種的目的，則需要調整試驗策略建立一系列適合彎曲菌的重現性好的分析方法。

實時熒光 PCR 法

實時熒光 PCR 技術是將傳統的 PCR 擴增和檢測相結合，在 PCR 反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個 PCR 進程，通過標準曲線對未知模板進行定性定量分析的方法。根據熒光標記方法一般分為染料法和探針法。

與傳統的 PCR 相比，實時熒光 PCR 方法具有特異性更強、靈敏度更高、自動化程度高、有效解決 PCR 污染問題等優點，在 21 世紀初已廣泛應用于各種領域，包括彎曲菌等食源性致病菌的快速檢測中。但對人員的要求較高，也需特定的較為昂貴的儀器，使其在實際應用中受限。

檢測空腸彎曲菌的方法很多，各有利弊，建立一個更快速簡便、更穩定可靠、更高效準確、更低成本的彎曲菌檢測技術是保證公共衛生和食品安全的迫切需求。可以預見，多種檢測技術的有機結合和優勢互補有望解決上述需求。