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簡述無血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點(diǎn)

2018-11-22 12:59來源:締一生物

近年來,隨著生物醫(yī)藥技術(shù)的快速發(fā)展,細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、商業(yè)應(yīng)用和生物制品等多個(gè)領(lǐng)域。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于分離、增殖和鑒定病毒,也適用于篩選抗癌藥物和對(duì)有毒物質(zhì)進(jìn)行檢測等方面的研究。


可以利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行大規(guī)模生物制品研發(fā),如單克隆抗體、疫苗及重組蛋白的制備、藥物開發(fā)、干細(xì)胞移植、人造器官培養(yǎng)等。因此,細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已成為科學(xué)研究和醫(yī)藥制品開發(fā)的關(guān)鍵因素之一。


細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中使用的培養(yǎng)基主要包括合成細(xì)胞培養(yǎng)基和天然細(xì)胞培養(yǎng)基,其中應(yīng)用廣泛的是天然培養(yǎng)基。血清是一種在體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)加入的物質(zhì),它是在血漿中去除纖維蛋白原而分離出的一種成分十分復(fù)雜的混合物,用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清。



血清中富含細(xì)胞生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì),在細(xì)胞培養(yǎng)過程中具有重要作用但實(shí)際生產(chǎn)中血清提取工藝復(fù)雜,成本高昂,給大規(guī)模生產(chǎn)帶來困難,不利于商業(yè)化開發(fā),且血清成分復(fù)雜,無法有效質(zhì)控,常見細(xì)胞源疫苗血清殘留對(duì)疫苗免疫效果有很大的影響。


疫苗生產(chǎn)多采用M199、DMEM、MEM等培養(yǎng)基加新生牛血清的方式,但由于血清成分的復(fù)雜性和不確定性,疫苗生產(chǎn)企業(yè)期待新型無血清培養(yǎng)基的上市。近年來,市面上出現(xiàn)了無血清培養(yǎng)基。無血清培養(yǎng)已成為包括疫苗在內(nèi)的生物技術(shù)藥物生產(chǎn)的總趨勢。由于無血清培養(yǎng)基可完全采用已知分子結(jié)構(gòu)或構(gòu)型組分的低蛋白, 甚至完全不采用蛋白組分, 因此被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞工程領(lǐng)域。


締一生物為您介紹一款可無血清培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)基,由國際上HiMedia公司生產(chǎn)M199改良型——SFRE 199細(xì)胞培養(yǎng)基。SFRE 199分為I型和II型,即SFRE 199-1和SFRE 199-2。開始研發(fā)是為了生長和維持培養(yǎng)Bak細(xì)胞(原代狒狒腎細(xì)胞)。


SFRE-199將M199標(biāo)準(zhǔn)配方中的精氨酸增加到150mg/L,半胱氨酸增至4mg/L,胱氨酸增至40mg/L,谷氨酰胺增至300mg/L,谷氨酸增至75mg/L,甘氨酸增至100mg/l,組氨酸增至40mg/L,酪氨酸增至80mg/L,以獲得較好的細(xì)胞生長而未表現(xiàn)出毒性。另外,還降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。SFRE 199-1與SFRE 199-2的不同在于,前者含有Hank's鹽,而后者所含為Earle's鹽。與加胎牛血清的常規(guī)培養(yǎng)基比較,細(xì)胞生長速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同。均在移植后第6天單層細(xì)胞達(dá)到充分融合。


有報(bào)道,在SFRE 199-1生長的原代Bak細(xì)胞的群體二倍分裂時(shí)間(PDT)約為34.2小時(shí),與加有5%牛血清的HLH(含水解乳白蛋白的HBSS)相同,加有3%胎牛血清的M199的PDT為36小時(shí)。如果在SFRE 199-1中去除胰島素或硫酸鋅,則細(xì)胞不能融合,PDT延長。若含有胰島素和硫酸鋅,則其支持生長的能力相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照血清培養(yǎng)基。


近年來,無血清培養(yǎng)基的應(yīng)用越來越廣泛,但也各有利弊,本文締一生物為您介紹無血清培養(yǎng)基的主要優(yōu)缺點(diǎn):


優(yōu)點(diǎn):

①無血清培養(yǎng)基不含血清,提高了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性、準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性;

②避免了血清所帶來的血源性污染等問題,減少血清未知成分對(duì)細(xì)胞的損傷;

③無血清培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)來源于重組蛋白或蛋白水解產(chǎn)物,提高了實(shí)驗(yàn)效率;

④無血清培養(yǎng)基的成分和含量相對(duì)明確,能提高細(xì)胞產(chǎn)品的質(zhì)量并有利于產(chǎn)物的分離提純;⑤無血清培養(yǎng)基在生物醫(yī)藥等領(lǐng)域有著極大的應(yīng)用潛能;

⑥制備流程簡易,操作簡單。


缺點(diǎn):

①無血清培養(yǎng)基的生產(chǎn)成本較高,不利于商業(yè)化開發(fā)與應(yīng)用;

②目前低血清培養(yǎng)基研究開發(fā)的相關(guān)數(shù)據(jù)缺乏在線交流,可查閱的資料有限,不能有效促進(jìn)細(xì)胞馴化技術(shù)的發(fā)展;

③多數(shù)無血清培養(yǎng)基的應(yīng)用不廣泛,通用性較低,不具有普遍性;

④細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中,對(duì)外界條件如物理和化學(xué)等因素的改變較敏感。  


締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)和檢測領(lǐng)域,一如既往地為您帶來優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。


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