常用的幾種生理生化鑒定實驗

大分子物質水解反應

生物對大分子的淀粉、蛋白質和脂肪不能直接利用，必須靠產生的胞外酶將大分子物質分解才能被微生物吸收利用。胞外酶只要為水解酶，通過加水裂解大的物質為較小的化合物，使其能被運輸至細胞內。

淀粉酶水解淀粉為小分子的糊精、雙糖和單糖；脂肪酶水解脂肪為甘油和脂肪酸；蛋白酶水解蛋白質為氨基酸等。這些過程均可通過觀察細菌菌落周圍的物質變化來證實；淀粉遇碘液會產生藍色，但細菌水解淀粉的區域，用碘測定不在產生藍色，表明細菌產生淀粉酶。脂肪水解后產生脂肪酸可改變培養基的pH，使pH降低，加入培養基的中性紅指示劑會使培養基從淡紅色變成深紅色，說明胞外存在著脂肪酶。

糖發酵試驗

糖發酵試驗是常用的鑒別微生物的生化反應，在腸道細菌的鑒定上尤為重要。絕大多數細菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們在分解糖類物質的能力上有很大的差異。有些細菌能分解某種糖產生有機酸（如乳糖、醋酸、丙酸等）和氣體（如氫氣、甲烷、二氧化碳的等）；有些細菌只產酸不產氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產酸并產氣；傷寒桿菌分解葡萄糖產酸不產氣，不能分解乳糖；普通變形桿菌分解葡萄糖產酸產氣，不能分解乳糖。

發酵培養基含有蛋白胨，指示劑（溴甲酚紫），倒置的德漢氏小管和不同的糖類。當發酵產酸時，溴甲酚紫指示劑可由紫色（pH6.8）變為黃色（pH5.2）。氣體的產生可由倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明。

IMViC反應

IMViC反應是吲哚試驗、甲基紅試驗、伏-普試驗和檸檬酸試驗4個試驗的首字母縮寫。這四個實驗主要是用來快速鑒別大腸桿菌和產氣桿菌，多用于水的細菌檢查。

吲哚試驗：某些細菌有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸形成吲哚（靛基質），吲哚能與對二甲基氨基苯甲醛作用生成玫瑰吲哚而呈紅色。

甲基紅試驗：某些細菌在糖代謝過程中，分解葡萄糖產生丙酮酸，丙酮酸進一步被分解成為甲酸、乙酸、琥珀酸等，使培養基pH下降至4.5以下，加入甲基紅指示劑可呈紅色。如細菌分解葡萄糖產酸量少，或產生的酸進一步轉化為其他物質（如醇、醛、酮、氣體和水），培養基pH在5.4以上，加入甲基紅指示劑呈橘黃色。本試驗常與V-P試驗一起使用，因為前者呈陽性的細菌，后者通常為陰性。

伏-普（二乙酰）試驗：某些細菌能發生如下轉換：葡萄糖→丙酮酸（脫羧）→乙酰甲基甲醇→2，3—丁烯二醇，在有堿存在時氧化成二乙酰，后者和胨中的胍基化合物起作用產生粉紅色的化合物。本試驗目的在于測定細菌產生乙酰甲基甲醇的能力。

檸檬酸試驗：當細菌利用銨鹽作為**氮源，并利用檸檬酸鹽作為**碳源時，若細菌能利用這些鹽作為氮源和碳源而生長，則能利用檸檬酸鈉產生碳酸鹽，從而與利用銨鹽產生的氨反應，形成NH4OH，使培養基呈堿性，使指示劑溴麝香草酚藍（BTB）由淡綠轉為深藍。

生化反應種類繁多，操作復雜過程繁瑣，耗時較長，現市面上已出現生理生化反應試劑盒，但市面上試劑盒產品魚目混雜，質量難以保證，那么如何選擇一款高品質，操作簡單，結果準確的鑒定試劑盒呢？

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、尿素代謝實驗（尿素分解酶實驗）、丙二酸鹽代謝實驗、ONPG實驗（β-半乳糖苷酶實驗 ）

、葡萄糖醛酸酶檢測實驗、硝酸鹽還原實驗、七葉靈水解實驗、硫化氫產生實驗、運動性檢測實驗、過氧化氫酶實驗（觸酶實驗）、氧化酶實驗、耐鹽實驗、吡咯烷酮酶實驗（PYR實驗）、堿性磷酸酶實驗。

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