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用于疫苗生產的Vero細胞

2018-12-17 09:15來源:締一生物


Vero細胞是日本學者Yasumura等于1962年從正常成年非洲綠猴腎分離獲得的貼附依賴性細胞系, Vero一詞由世界語中的verde(意為綠色的)和reno意為腎臟的)兩個詞合并而成。Vero細胞是世界衛生組織和我國生物制品規程認可的疫苗生產細胞系。


與用作疫苗生產的原代細胞、二倍體細胞和其他一些傳代細胞基質相比,Vero細胞具有以下特點:


①來源方便,可連續傳代,生長速度快;

②對多種病毒的感染敏感、病毒增殖滴度高;

③遺傳性狀穩定,惡性轉化程度低,生物安全性較高;

④培養條件要求不苛刻,易于在生物反應器實施大規模培養。


疫苗的接種對象主要是大范圍的健康人群,其質量和安全性一直是備受關注的重要問題。疫苗的質量和安全性在很大程度上取決于疫苗的生產方式和過程。血清是一種組分復雜而尚不完全明確的混合物,至少含有1 000種不同的蛋白質,總蛋白量高達60~150g/L,它能為細胞的體外培養提供必要的生長因子、激素、細胞貼附因子和營養成分。


受Vero細胞自身的貼附依賴生長特性和動物細胞培養技術發展進程的影響,本世紀之前的Vero細胞培養及病毒疫苗生產均存在著對血清的依賴。血清組分的復雜性和不確定性,以及其中存在病毒等病原微生物污染的潛在風險,影響著病毒疫苗的生產工藝和疫苗質量。


從病毒疫苗生產工藝角度考慮,血清組分的復雜性和批次間的質量差異增加了病毒疫苗生產的不穩定性和產品質量控制的難度;從病毒疫苗的安全性角度考慮,血清中潛在的病原微生物,如引起牛海綿狀腦炎的阮病毒,給疫苗的使用帶來了不容忽視的安全隱患閻。由血清使用所造成的細胞培養過程和細胞表達產物安全性的不確定因素增加的現實問題,成為動物細胞無血清培養技術研究和應用的發展動因。


隨著動物細胞無血清培養技術的不斷進步,為包括Vero細胞在內的動物細胞大規模無血清培養技術的應用提供了必要的技術支撐,無血清培養已成為包括疫苗在內的生物技術藥物生產的總趨勢問。2010年,美國、歐盟和日本等發達國家全面停止在生物制藥中應用血清,FDA停止含血清細胞培養工藝生產的生物技術新藥的申報受理。


國外報道用可以用HiMedia生產的SFRE 199-1培養基作為Vero無血清細胞培養基的基礎成分,細胞生長較快,狀態亦佳。SFRE 199-1是對M199培養基的改良型,開始用于原代狒狒腎(Bak)細胞的生長和維持。


SFRE 199-1添加了胰島素、丙酮酸鈉、硫酸鋅,與M199相比提高了精氨酸-鹽酸、半胱氨酸、胱氨酸、L -谷氨酰胺、L -谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、酪氨酸和葡萄糖的濃度,使其實現活性較大的同時而不產生毒性。SFRE 199 -1還添加了半乳糖,以避免乳酸過度積累,并使pH值在細胞維持期內保持在生理范圍。


另外,SFRE 199系列的還有另一款——SFRE 199-2,SFRE 199-1與SFRE 199-2的不同在于,前者含有Hank's鹽,而后者所含為Earle's鹽。與加胎牛血清的常規培養基比較,細胞生長速率、產量和蛋白容量均相同,均在移植后第6天單層細胞達到充分融合,有報道用不加血清的SFRE-199-2培養牛輸卵管峽部上皮細胞和壺腹上皮細胞,體外研究牛的受孕過程。


締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在細胞培養、微生物培養及檢測領域,一如既往地為您帶來優質的服務。


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