無血清的培養(yǎng)基的組成介紹

無血清培養(yǎng)基（serum free medium，SFM）是繼天然培養(yǎng)基、有血清合成培養(yǎng)基之后研制的一類既能滿足細(xì)胞在體外較長時間生長繁殖又無需添加血清避免外源物質(zhì)污染的合成培養(yǎng)基，是目前及未來生物工程領(lǐng)域的一大趨勢。無血清培養(yǎng)基成分較明確，制備簡單，采用無血清培養(yǎng)技術(shù)可適當(dāng)降低生產(chǎn)成本，增加目的產(chǎn)物表達(dá)并其簡化分離純化步驟，避免外源病毒污染。

無血清培養(yǎng)基由營養(yǎng)較完全的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和補(bǔ)充因子而組成。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基

1950年Morgan等在前人的研究基礎(chǔ)上研究出199培養(yǎng)基，是動物細(xì)胞培養(yǎng)基發(fā)展到一個嶄新的階段，即合成培養(yǎng)基階段。在不同細(xì)胞培養(yǎng)時，根據(jù)細(xì)胞需求對成分已知的基礎(chǔ)培養(yǎng)基組分進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整即可使細(xì)胞更好地生長并提高目的產(chǎn)物的表達(dá)量。如HiMedia公司生產(chǎn)的SFRE199，是在M199的基礎(chǔ)上進(jìn)行改良的。

SFRE 199與M199的不同點(diǎn)在于升高了8種氨基酸（精氨酸-鹽酸、半胱氨酸、胱氨酸、L -谷氨酰胺、L -谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、酪氨酸）和葡萄糖的濃度，細(xì)胞生長較好且未體現(xiàn)出毒性，并加入硫酸鋅、丙酮酸鈉和魚精蛋白鋅胰島素。另外，還降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。SFRE 199-1與SFRE 199-2的不同在于，前者含有Hank's鹽，而后者所含為Earle's鹽。

主要添加因子

又稱補(bǔ)充因子，是代替血清的各種因子的總稱。多數(shù)無血清培養(yǎng)液必須補(bǔ)加3－8種因子。胰島素、亞硒酸鈉和轉(zhuǎn)鐵蛋等白是必須補(bǔ)充因子，其他多數(shù)為輔助作用的因子。按其功能不同，補(bǔ)充因子可分為四類：

激素和生長因子。

很多細(xì)胞用無血清培養(yǎng)時需要加入激素，如胰島素、生長激素、胰高糖素等。胰島素是重要的細(xì)胞存活因子，與細(xì)胞上的胰島素受體結(jié)合后可促進(jìn)RNA、蛋白質(zhì)和脂肪酸的合成，抑制細(xì)胞凋亡。此外，雌二醇、孕酮、氫化可的松等也是無血清培養(yǎng)基中常添加的補(bǔ)充因子。

結(jié)合蛋白。

轉(zhuǎn)鐵蛋白與細(xì)胞上的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體結(jié)合是細(xì)胞獲取鐵元素的主要來源，白蛋白與脂類、激素、維生素、金屬離子和生長因子結(jié)合后可調(diào)節(jié)上述物質(zhì)在無血清培養(yǎng)基中活性。

貼壁因子。

在無血清培養(yǎng)基中加入纖粘連蛋白、膠原和多聚賴氨酸等貼壁因子可減少細(xì)胞貼壁的時間，實(shí)現(xiàn)更好地培養(yǎng)。

其他補(bǔ)充因子。

一些細(xì)胞培養(yǎng)使用的無血清培養(yǎng)基還需補(bǔ)充微量元素、維生素、脂類等低分子量物質(zhì)。

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)及檢測領(lǐng)域，一如既往地為您帶來優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。

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