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Vero細胞的來源及優(yōu)勢介紹

2018-12-27 10:38來源:締一生物


近年來隨著生物技術的發(fā)展,動物細胞培養(yǎng)技術已從簡單的試驗研究拓展到了生物學研究和商業(yè)應用領域。生物制品如生物基因工程疫苗、病毒性疫苗、醫(yī)學治療性抗體的研究與生產(chǎn)都用到了細胞培養(yǎng)技術。應用較廣泛較安全的動物細胞基質(zhì)是Vero細胞。Vero細胞是世界衛(wèi)生組織(WHO)和《中國藥典》認可的疫苗生產(chǎn)細胞系。




Vero細胞(非洲綠猴腎細胞)是日本學者Yasumura和Kawakita兩人在1962年正式從非洲綠猴腎臟分離的,初次用于生產(chǎn)人用生物制品的異倍體貼附依賴性細胞,并建立了細胞系和不同代次的細胞庫。在此之前,對生物制品的研究和生產(chǎn)只允許用原代細胞或二倍體細胞。


二倍體細胞系傳代次數(shù)有限,當傳代達到一定代次后就會衰老凋亡,致使生產(chǎn)工藝無法投入到規(guī)模化生產(chǎn)。長久以來,人們對將傳代細胞作為生物制品生產(chǎn)基質(zhì)的考慮和應用很少,因檢測手段有限,對其致瘤性和外源性污染等特性研究不清楚,直到1987年,WHO才正式批準傳代細胞系作為生物制品生產(chǎn)的基質(zhì)。


Vero細胞被批準用于人用疫苗的生產(chǎn)后,開始生產(chǎn)的人用疫苗是Barrett等[1]生產(chǎn)的脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗(IPV),之后Vero細胞用于狂犬病毒疫苗和口服脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗(OPV)等多種人用疫苗生產(chǎn)。Vero細胞在病毒性疫苗生產(chǎn)的應用已有30年之久,尤其是狂犬病毒疫苗和脊髓灰質(zhì)炎疫苗。


Vero細胞系廣泛應用于人用疫苗的生產(chǎn)是基于其獨特的特性。Vero細胞因其固有的基因缺陷,不能表達抗病毒蛋白干擾素。Barrett等[1]試圖用新城疫病毒、仙臺病毒、風疹病毒感染Vero細胞生產(chǎn)干擾素,結果表明Vero細胞不能表達分泌干擾素蛋白。然而,在相同條件下,改用BSC-1細胞和其他靈長類動物細胞重復這一實驗時,這些細胞系可以表達分泌大量干擾素蛋白。有文獻報道,Vero細胞可能存在β和α基因的缺陷,不能表達干擾素蛋白[2]。Vero細胞的廣泛易感特性促進了使用Vero細胞生產(chǎn)疫苗事業(yè)的發(fā)展。


除了以上優(yōu)勢,與生產(chǎn)生物制品生產(chǎn)用原代細胞系和二倍體細胞系相比,Vero細胞還具有以下優(yōu)勢:

一、來源方便,容易建立細胞庫和保存,可連續(xù)傳代,生長速度快;

二、Vero細胞遺傳性狀穩(wěn)定,惡性化概率小,無外源性污染,具有良好的生物安全特性;

三、Vero細胞對多種病毒敏感,生產(chǎn)的病毒滴度高;

四、Vero細胞對培養(yǎng)條件要求不高,在微載體表面能良好的貼附生長,易在生物反應器放大培養(yǎng)。


培養(yǎng)基的質(zhì)量直接關系到疫苗的品質(zhì)。目前用于Vero細胞的培養(yǎng)基主要有M199、MEM、DMEM等合成培養(yǎng)基。近有報道,HiMedia公司生產(chǎn)的SFRE 199培養(yǎng)基(SFRE 199是在基礎培養(yǎng)基M199的基礎上改良的)也可用于Vero細胞的無血清培養(yǎng)[3]。如下圖所示,分別用添加水解乳蛋白的F-12和SFRE 199-1培養(yǎng)Vero細胞,結果顯示Vero細胞在無血清的SFRE199-1中生長狀態(tài)良好。



參考文獻

[1] Barrett PN,Mundt W,Kistner O,et al. Vero cell platform in vaccine production: moving towards cell culture-based virul vaccines[J]. Expert Rev Vaccines,2009,8(5) ,607-618.

[2] 吳雪伶,袁寶珠. 干擾素系統(tǒng)的完整性與 Vero 細胞病毒敏感性的相關性[C]/ /2012 年中國藥學大會暨第十二屆中國藥師周論文集. 北京: 中國藥學會,2012.

[3] Jack Litwin.The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. State Bacteriology Laboratory, 105 21 Stockholm, Sweden.



締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在細胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)及檢測領域,一如既往地為您帶來優(yōu)質(zhì)的服務。


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