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HiMedia產(chǎn)品解疑

2019-03-21 15:35

HiMedia產(chǎn)品解疑

（使用脫水培養(yǎng)基經(jīng)常遇到的問題）


問題

可能的原因

建議

pH值不對

1.過熱

2.滅菌時間太長

3.使用了堿性玻璃，容器內(nèi)有殘留或水不純

4.反復(fù)熔化，導(dǎo)致成分水解

5.在高溫下保存太久

6.在25℃以上測量的pH值

7.蒸餾水的初始pH值有問題

2.png

1.XLD瓊脂（M031）標(biāo)準(zhǔn)顏色——紅色透明

2.蒸餾水呈酸性pH值，使得XLD瓊脂呈現(xiàn)霧狀。

1.不要過熱。

2.滅菌應(yīng)按規(guī)定的時間和溫度進行。

3.檢查玻璃器皿的pH值。

4.僅取所需數(shù)量的培養(yǎng)基進行復(fù)溶，并避免多次重熔。避免準(zhǔn)備過量的培養(yǎng)基。

5.將培養(yǎng)基存放在干燥通風(fēng)的室內(nèi)，避免極端的溫度。

6.含有碳水化合物的培養(yǎng)基過熱，會導(dǎo)致pH值急劇變化

7.蒸餾水的pH值應(yīng)在6.0-7.0之間。

因此，應(yīng)嚴格按照規(guī)定進行滅菌。對于含有額外添加碳水化合物的培養(yǎng)基，應(yīng)將培養(yǎng)基和碳水化合物分別滅菌再混勻。


不完全溶解

1.加熱不充分，缺少攪拌

2.在25℃以上測量的pH值

3.用的容器太小（偶爾有些培養(yǎng)基自身即帶沉淀，如BS瓊脂）

4.容器有殘留或使用了堿性玻璃

1.滅菌前煮沸培養(yǎng)基。

2.檢查蒸餾水的pH值。pH值應(yīng)在6.0-7.0之間

3.使用足夠大的容器。

4.檢查玻璃器皿的pH值。



3.png


培養(yǎng)基變暗

1.培養(yǎng)基過度加熱

2.培養(yǎng)基稱重不正確，過量

3.不正確的pH值

4. 反復(fù)熔化

5.培養(yǎng)基過期或變質(zhì)

1.不要過熱。

2.不要加入過量的干粉。按照克/升復(fù)溶干粉。

3.檢查蒸餾水的pH值，應(yīng)為6.0-7.0

4.避免再熔和再制備培養(yǎng)基。

5.在有效期內(nèi)使用培養(yǎng)基。



4.png


凝膠變軟

1.瓊脂沒在溶液中，脫水培養(yǎng)基沒完全復(fù)溶

2.瓊脂發(fā)生酸水解

3.加入接種液導(dǎo)致瓊脂稀釋，而未能補足。

1.檢查蒸餾水的pH值。 蒸餾水的pH應(yīng)該介于6.0-7.0之間。

2.蒸餾水的酸性pH導(dǎo)致瓊脂水解，溶解不完全。

3.嚴格按照規(guī)定的說明進行滅菌。避免過度滅菌，這可能導(dǎo)致凝膠變軟。



5.png


菌落沒有長出

因為培養(yǎng)基的原因：

1.培養(yǎng)基反復(fù)熔化

2.過度加熱

3.不充分的混勻

4. 因成分稀釋，而未能彌補其鑒別特性

5.培養(yǎng)基過期或變質(zhì)

6.使用了不正確的配方

1.避免反復(fù)重熔。在給定時間內(nèi)只復(fù)溶需要量的培養(yǎng)基。

2.不要過熱。

3.確保適當(dāng)?shù)幕靹颉?/span>

4.使用適量的接種菌量。請勿在有效期過后使用菌液制備用培養(yǎng)基。

5.在有效期內(nèi)使用培養(yǎng)基。

6.根據(jù)說明書使用規(guī)定量的培養(yǎng)基。


因為增補劑的原因：

1.增補劑過期或變質(zhì)

2.增補劑未很好的復(fù)溶。所加濃度不夠。增補劑添加不正確，如培養(yǎng)基過熱或濃度有誤。

3.增補劑未正確與培養(yǎng)基混勻。

1.在效期內(nèi)使用增補劑。

2.根據(jù)說明書上的規(guī)定，使用規(guī)定量的增補劑，配置為規(guī)定濃度。

3.確保增補劑與培養(yǎng)基正確混勻。



6.png


培養(yǎng)基顏色變化（含指示劑的培養(yǎng)基）

培養(yǎng)基pH值在滅菌前后沒有在規(guī)定的范圍內(nèi)

1.檢查用于制備蒸餾水的水的pH值。蒸餾水pH值應(yīng)在6.0-7.0之間。

2.在pH漂移的情況下，可使0.1N Cl/0.1N NaOH調(diào)節(jié)pH。


7.png


培養(yǎng)基有沉淀

通常發(fā)生在含無機鹽的培養(yǎng)基

1.建議使用蒸餾水溶解干粉培養(yǎng)基。也可以使用純凈水。

2.推薦條件之外的培養(yǎng)基過熱或過度滅菌，會導(dǎo)致沉淀。

3.這通常在含有磷酸鹽的培養(yǎng)基上觀察到。應(yīng)該進行水的兼容性檢查。



8.png


制備好的培養(yǎng)基儲存時變暗

1.培養(yǎng)基含糖濃度高，并被持續(xù)加熱

2.培養(yǎng)基存儲溫度高

1.不要過熱

2.應(yīng)按照推薦的時間和溫度進行滅菌

3.避免持續(xù)地熔化

4.避免所配制的培養(yǎng)基長時間暴露于50°C以上的高溫。


9.png


流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基中的環(huán)不勻稱或環(huán)發(fā)生扭曲（M009）

1. 瓊脂消化不當(dāng)

2. 沸騰不足

1.高壓前保證瓊脂顆粒的完全消化，以避免出現(xiàn)相分離。

2. 正確消化、高壓和冷卻，不擾動培養(yǎng)基，才會形成密致環(huán)。


10.png


制備好的流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基（M009）有松弛環(huán)

配制好的培養(yǎng)基的擾動

再加熱和冷卻后，環(huán)可恢復(fù)原來的形狀


11.png


在高壓滅菌罐中，流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基有雙環(huán)形成

因為氧氣吸收

確保正確夾緊底部通氣口。如果松動，吸收大氣中的氧氣會導(dǎo)致雙環(huán)形成。