研究雙歧桿菌的利器

雙歧桿菌是革蘭氏陽性有分叉的桿菌（Y型，如兩歧雙歧桿菌；也有V型，如嬰兒雙歧桿菌或短桿狀，如長雙歧桿菌）。它越來越得到人類的重視。它作為人類腸道的長期定居菌（在嬰兒中甚至為顯著優勢菌），對人的生理作用起到不可忽視的影響，例如：它刺激機體的免疫反應，形成腸道屏障，阻止致病菌的入侵，合成人體所需的維生素等。雙歧桿菌制劑常用于治療菌群失調、腹瀉、幽門螺桿菌陽性的消化道潰瘍等疾病。在酸奶中加入雙歧桿菌作為發酵菌種，其保健效果也大為提高。曾有**的微生物學家指出：“光輝的抗生素之后的時代，將是活菌制劑的時代”。

鑒于雙歧桿菌的重要價值，我們常需要將雙歧桿菌同其他乳酸菌區別開來。現有的《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 雙歧桿菌檢驗》存在一定的局限，在鑒定方面，這個標準只適合食品中僅含有單一雙歧桿菌菌種的鑒定。在計數方面，它只適合食品中僅含有雙歧桿菌屬的計數。而在實際情況中，常常是多個菌屬混雜的情況。HiMedia開發的雙歧桿菌顯色培養基HiCrome? Bifidobacterium Agar，可很好地將雙歧桿菌同乳桿菌區分開來。

該培養基除了含有必要的營養外，還含有牛奶蛋白，它有助于檢測酪蛋白水解反應。如有該反應，則菌落會有不透明光暈（短雙歧桿菌為該反應陽性）；同時含有多種顯色劑，有助于鑒別乳桿菌和雙歧桿菌。乳桿菌菌落在該培養基上表現為綠色菌落和不透明光暈，嬰兒雙歧桿菌表現為深藍色至藍綠色菌落，短雙歧桿菌表現為粉紅色菌落，有不透明光暈（見下圖）。

HiMedia還提供有雙歧桿菌的生化鑒定試劑盒（貨號KB021），該試劑盒包含了12種生化試驗，為觸酶試驗、阿拉伯糖試驗、纖維二糖試驗、果糖試驗、乳糖試驗、麥芽糖試驗、甘露糖試驗、蜜二糖試驗、棉子糖試驗、蔗糖試驗、木糖試驗、水楊苷試驗。所調菌落可接種在５ml雙歧桿菌肉湯（M1395）中，35-37℃厭氧培養6-18小時，直到菌液濁度≥0.1OD（620nm）或0.5麥氏單位。然后無菌打開試劑盒，撕掉封條。在鑒定卡中每孔接種50μl菌液，35℃-37℃厭氧孵育24-48小時。孵育后，完成觸酶試驗，在第1孔用接種環在孔內培養基生長表面刮擦取樣，然后蘸到含3%H2O2溶液的干凈試管中。接種環表面冒泡為陽性反應。沒有冒泡為陰性反應。然后根據結果詮釋表和菌種標準表，完成菌種鑒定。該試劑盒一共可鑒定35種雙歧桿菌。

HiMedia公司還提供了一款雙歧桿菌選擇性計數瓊脂（貨號M1734），用于發酵乳和乳酸菌飲品中的雙歧桿菌計數。該培養基含有高純度的低聚半乳糖，很好的支持雙歧桿菌生長；同時含有鹽酸半胱氨酸，創造出雙歧生長所需的還原條件；而培養基中的莫匹羅星則抑制大多數的乳業所用的乳酸菌生長。用標準菌株證實，接種的50-100CFU雙歧桿菌能在該培養基中旺盛生長。

雙歧桿菌的鑒定有助于選育優良的雙歧桿菌菌株，開發雙歧桿菌發酵飲品或制劑。在這方面，HiMedia的雙歧桿菌顯色培養基、生化鑒定試劑盒以及還可提供的雙歧桿菌選擇性計數瓊脂，無疑為研究人員和質檢人員對雙歧桿菌的分離、鑒定和計數提供了極大的便利。