HiMedia培養(yǎng)基的質(zhì)控流程

HiMedia提供種類繁多的培養(yǎng)基配方，包括標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基和客戶定制的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基以脫水形式提供，可用于不同領(lǐng)域：臨床、食品、環(huán)境、化妝品、乳品、水、制藥行業(yè)等。也包括各種藥典指定的具有各種應(yīng)用的培養(yǎng)基，如無(wú)菌檢查，微生物限度檢查等。

M1991I    CCA顯色培養(yǎng)基

我們的質(zhì)量保證

流程分為以下三類：

1.原料檢查

2.半成品檢查

3.成品檢查

?原料

微生物培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)，需要對(duì)每個(gè)成分進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的評(píng)估，并測(cè)量每個(gè)成分之間的相互作用。清楚這兩點(diǎn)非常重要，HiMedia因此在生產(chǎn)前和生產(chǎn)過程中，采取了不同的質(zhì)控檢測(cè)措施。理想的終產(chǎn)品需要具有可預(yù)測(cè)的可重復(fù)的結(jié)果。

只有高品質(zhì)的原料才用于生產(chǎn)HiMedia的產(chǎn)品。原料只從合格的供應(yīng)商那里購(gòu)買。每個(gè)原料會(huì)根據(jù)各國(guó)藥典去分析它的級(jí)別、品質(zhì)和純度。對(duì)于沒有具體規(guī)定的原料和化學(xué)品，我們有質(zhì)量保證部門制訂的自己的室內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)。

加入脫水培養(yǎng)基中的各種原料有：

1.蛋白胨、HiVegTM蛋白胨、HiCynthTM蛋白胨、肉提取粉B（相當(dāng)于牛肉粉）作為氮源

2.碳水化合物作為碳源

3.礦物質(zhì)（金屬和無(wú)機(jī)鹽）

4.選擇因子

5.維生素

6.染料和pH指示劑

7.凝固劑

1.蛋白胨（肉、酪蛋白、大豆、明膠、酵母）、HiVegTM蛋白胨和HiCynthTM蛋白胨

蛋白質(zhì)水解的降解產(chǎn)物俗稱蛋白胨，是多肽，寡肽，氨基酸，有機(jī)氮堿，鹽和微量元素的的混合物。生產(chǎn)出的各種蛋白胨反映了微生物對(duì)氨基酸和多肽的不同需求。蛋白質(zhì)（酪蛋白，肉或大豆）來(lái)源和水解類型不同（如酶解或酸水解，酶解包括胰蛋白酶、胃蛋白酶或木瓜蛋白酶），其蛋白胨也存在著變化。HiCynthTM蛋白胨是化學(xué)成分確定的蛋白胨，其提供的氮源營(yíng)養(yǎng)與其他動(dòng)物或植物蛋白胨等同。

圖. 采用不同蛋白胨培養(yǎng)的E.coli生長(zhǎng)曲線

除了HiMedia自己的標(biāo)準(zhǔn)，蛋白胨還依據(jù)美國(guó)藥典關(guān)于“動(dòng)物組織的酶解”以及相似的“酪蛋白的胰蛋白酶水解”標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分析。

2. 碳水化合物

一些微生物能利用的碳水化合物（糖）種類非常廣泛，而其他微生物對(duì)糖的選擇更為挑剔，后者更通過糖發(fā)酵能力進(jìn)行鑒定。大量培養(yǎng)基配方包含特定的糖和指示劑，以用于檢測(cè)特定的酶反應(yīng)和用于診斷。

培養(yǎng)基中的糖會(huì)被檢測(cè)，以保證其化學(xué)身份和純度。

糖對(duì)于微生物的支持生長(zhǎng)也會(huì)通過固體培養(yǎng)基或液體培養(yǎng)基進(jìn)行檢測(cè)，并與標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)。在固體培養(yǎng)基中，菌落的特征也會(huì)被檢查。

MV378   動(dòng)力學(xué)吲哚鳥氨酸HiVeg培養(yǎng)基

1.對(duì)照

2.大腸埃希菌（ATCC 25922）

3.肺炎克雷伯菌（ATCC 13883）

4.奇異變形桿菌（ATCC 25933）

M689   Moeller脫羧酶肉湯（含鹽酸精氨酸）

1.對(duì)照

2.弗氏腸桿菌（ATCC 8090）

3.產(chǎn)氣腸桿菌（ATCC 13048）

4.大腸埃希菌(ATCC 25922）

5 肺炎克雷伯菌（ATCC 13883）

6.普通變形桿菌（ATCC 13315）

7.銅綠假單胞菌（ATCC 9027）

8.傷寒沙門氏菌(ATCC 6539）

9.福氏志賀氏菌（ATCC 12022）

3. 礦物質(zhì)和化學(xué)品

所有生命體的生長(zhǎng)和代謝都需要一些無(wú)機(jī)鹽。大多數(shù)細(xì)菌可通過培養(yǎng)基中添加

鈉、鉀、鎂、錳、二價(jià)鐵或三價(jià)鐵離子（以氯鹽、磷酸鹽、硫酸鹽形式）得到滿足。

4.選擇因子（膽鹽或牛膽汁）

膽鹽具有選擇性，用于鑒別那些能在腸道環(huán)境中生存的細(xì)菌，而不能生存的細(xì)菌。根據(jù)細(xì)菌對(duì)膽鹽的耐受性，在培養(yǎng)基中可升高膽鹽或膽鹽衍生物的濃度。

膽鹽的化學(xué)分析流程和標(biāo)準(zhǔn)是依據(jù)各國(guó)藥典關(guān)于脫氧膽酸鈉、膽酸鈉和牛磺膽酸鈉。當(dāng)膽鹽加入培養(yǎng)基時(shí)，它不應(yīng)影響指示劑的顏色或隨后的顏色變化。它不應(yīng)在培養(yǎng)基儲(chǔ)存后在表面形成泡沫或形成沉積。膽汁進(jìn)一步的功能測(cè)試是通過標(biāo)準(zhǔn)膽鹽作為對(duì)照。而且，細(xì)菌的回收試驗(yàn)是采用E.coli作為測(cè)試菌株之一，而膽鹽的已知性能作為對(duì)照。采用不同膽鹽制備的固體培養(yǎng)基是通過Miles-Misra方法進(jìn)行測(cè)試。每種培養(yǎng)基關(guān)于不同腸桿菌科成員的生長(zhǎng)回收率進(jìn)行了記錄。

5. 染料和pH值指示劑

添加到培養(yǎng)基中的染料也可用作選擇劑或pH指示劑或者Eh指示劑。當(dāng)用作選擇劑時(shí)，染料和配方中的其他成分之間可能發(fā)生相互作用。因此，同樣的煌綠樣品在不同的蛋白胨溶液中，對(duì)大腸桿菌可能會(huì)顯示出不同的抑制效果。膽鹽和煌綠相互作用，會(huì)減少染料的毒性，因此通過膽汁鹽培養(yǎng)基的染料加入，可以確定這些染料的毒性水平。苯胺染料在完全氧化時(shí)毒性更大，因此它在蛋白胨或胰蛋白胨里滅菌時(shí)，發(fā)生染料的還原，從而導(dǎo)致毒性變化是可能的。如果培養(yǎng)基中使用的瓊脂礦物質(zhì)含量高，與培養(yǎng)基成分不相容的情況可能就會(huì)發(fā)生。

因此，我們按照H.J. Conn撰寫的標(biāo)準(zhǔn)（注：2002年出版的Conn's Biological Stains,第10版）去分析我們培養(yǎng)基中使用的染料。除了確定染料的化學(xué)純度外，還開展微生物適應(yīng)性檢查。這些通過各種“測(cè)試用微生物”去檢測(cè)，并與標(biāo)準(zhǔn)染料比較。

6. 凝固劑

瓊脂在培養(yǎng)基中的最初作用是形成凝膠。瓊脂的透明度非常重要。理想狀況是瓊脂溶液是透明的，沒有任何霧狀或沉淀。霧狀是因?yàn)榈V物質(zhì)的不相容或過濾后還有殘?jiān)－傊牧硪粋€(gè)特點(diǎn)是它允許化合物擴(kuò)散，同時(shí)將水固定在剛性凝膠中。這個(gè)屬性被用于某些維生素和抗生素的微生物法測(cè)定，如藥敏試驗(yàn)的擴(kuò)散法，而維生素則產(chǎn)生出成比例的生長(zhǎng)帶。

在瓊脂用于細(xì)菌學(xué)方面時(shí)，它的化學(xué)不純成分也進(jìn)行了分析。

除了以上檢測(cè)，還檢測(cè)了瓊脂的毒性，以觀察是否存在毒性或抑制物質(zhì)。方法是讓苛養(yǎng)型微生物在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，其生長(zhǎng)狀況、菌落大小、菌落形狀、色素等，和已知的標(biāo)準(zhǔn)瓊脂進(jìn)行比較。

7.維生素

維生素和化學(xué)品是根據(jù)美國(guó)藥典和美國(guó)Food Chemical Codex進(jìn)行分析的。主要分析化學(xué)純度和其他參數(shù)。它們的效力則通過AOAC（美國(guó)分析化學(xué)家協(xié)會(huì)）的微生物方法進(jìn)行驗(yàn)證。

8.顯色底物

HiCrome的顯色培養(yǎng)基中都含有顯色底物，并且通常是2種顯色原的混合物。顯色原作為底物，被生長(zhǎng)菌的特異酶裂解，菌落產(chǎn)生不同顏色而可鑒別。例如，X-葡萄糖酸苷被E.coli的葡萄糖醛酸酶裂解，產(chǎn)生葡萄糖醛酸，并將藍(lán)綠色帶給菌落。

M1575

HiCrome EC 0157:H7選擇性瓊脂基礎(chǔ)

E. coli 0157:H7菌落

?半成品

一個(gè)樣本批次通過已測(cè)試并通過的組分制備，并和以前已通過批準(zhǔn)的完全培養(yǎng)基批次進(jìn)行并排分析。在確保所有參數(shù)如顏色、透明度、pH值、可溶性、成膠性和培養(yǎng)特征，以及保證培養(yǎng)基組分的相容性后，該批次可用于大規(guī)模的生產(chǎn)。

在生產(chǎn)中，每個(gè)環(huán)節(jié)會(huì)小心遵循GMP標(biāo)準(zhǔn)。中間階段，會(huì)取樣并送至質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室，根據(jù)HiMedia自己的規(guī)定，進(jìn)行微生物評(píng)價(jià)和純度分析。

半成品批次在可控條件下（如溫度、濕度等）連續(xù)記錄。生產(chǎn)過程采用不銹鋼設(shè)備或玻璃設(shè)備，避免產(chǎn)品被有毒金屬污染。

?成品

每個(gè)HiMedia產(chǎn)品都有確定的產(chǎn)品參數(shù)，它們包括合格產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)和成品批次的發(fā)布。成品需符合以下標(biāo)準(zhǔn)：

而且，我們建立了獨(dú)特的室內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)，將批間差異（因生物材料的相互影響）降低到0。

?可追溯性

作為一個(gè)ISO/CE認(rèn)證的公司，可追溯性是一個(gè)重要的質(zhì)量系統(tǒng)建立的標(biāo)準(zhǔn)。每個(gè)原料和每次生產(chǎn)過程都有細(xì)心的記錄。合格的成品樣品和生產(chǎn)過程中的各種記錄都有存檔，便于未來(lái)參考。

?驗(yàn)證

如果用戶將該培養(yǎng)基用于說明書、技術(shù)文件和COA上所列的用途之外，而又不及時(shí)分享這樣的意圖，這將消除我們?cè)诖耸律系呢?zé)任。建議客戶在自己的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行驗(yàn)證和測(cè)試。HiMedia是您值得信賴的合作伙伴，在與培養(yǎng)基相關(guān)的驗(yàn)證過程中給予幫助。

M1297AR 念珠菌鑒別瓊脂

?穩(wěn)定性研究

有代表性的批次可開展穩(wěn)定性研究，以確定新產(chǎn)品的保質(zhì)期，以及驗(yàn)證庫(kù)存產(chǎn)品的效力。6個(gè)月后，代表的批次會(huì)再次測(cè)試，以和參考產(chǎn)品比較，從而驗(yàn)證產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

M1651   芽孢桿菌顯色培養(yǎng)基

?分析證書

發(fā)布的每一批次都有詳細(xì)的分析證書，上面有產(chǎn)品的合格標(biāo)準(zhǔn)和測(cè)試結(jié)果。分析證書的紙質(zhì)拷貝可索引獲得，或直接從我們網(wǎng)站下載（www.himedialabs.com）