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采血年齡對(duì)牛血清性能的影響2019-05-27 14:37來(lái)源:威正翔禹|締一生物
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)基的重要組成部分,其質(zhì)量好壞對(duì)細(xì)胞狀態(tài)及數(shù)量增長(zhǎng)速度影響很大。常用的有胎牛血清、新生牛血清及小牛血清。牛的采血年齡是這三種血清區(qū)分的顯著標(biāo)志。小牛血清的采集對(duì)象是出生1年之內(nèi)的小牛,新生牛血清是出生24小時(shí)至2周內(nèi)的新生牛,胎牛血清則是6-10個(gè)月的胎牛。隨著采血年齡的增加,牛血清中的生長(zhǎng)因子減少,抗體和補(bǔ)體等含量增加。因此,鑒別血清原料的采血年齡段,防止成牛血清的參入是血清品質(zhì)檢測(cè)者所面臨的一個(gè)重要問(wèn)題。 有研究人員通過(guò)不同年齡段的牛血清在不同濃度下對(duì)SP2/0細(xì)胞株培養(yǎng)效果的比較試驗(yàn),用**增殖濃度、倍增時(shí)間、克隆率等指標(biāo)來(lái)推斷樣品血清的采血年齡段,其結(jié)果如下: SP2/0細(xì)胞株為鼠骨髓瘤細(xì)胞。首先,研究人員在無(wú)菌條件下,將7個(gè)供試血清0.22μm過(guò)濾除菌,然后將供試血清按10%、8%、6%、4%、2%的濃度分別加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細(xì)胞懸液中使細(xì)胞濃度為1×104/ml。充分混勻后在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔接種0.2ml,每個(gè)試驗(yàn)樣接種8孔。每24 h記數(shù)一孔,共記數(shù)7d。研究人員又將供試血清按8%的血清濃度加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細(xì)胞懸液中,將SP2/0細(xì)胞稀釋到5個(gè)/mL,分別接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,每孔0.2mL,每個(gè)供試血清樣品接種48孔,一周后計(jì)數(shù)克隆生成孔數(shù)。 結(jié)果顯示,在克隆率方面,采血年齡越小,效果越好,胎牛血清培養(yǎng)的細(xì)胞克隆率為85.4%,6h新生牛血清為79.1%,6月齡小牛血清為50%。在促細(xì)胞生長(zhǎng)效應(yīng)方面,隨著血清濃度從2%提高到10%,細(xì)胞**增殖數(shù)不斷升高,倍增時(shí)間縮短。血清濃度相同時(shí),采血年齡約越小,細(xì)胞數(shù)最高,倍增時(shí)間越短。不同年齡段的牛血清對(duì)促細(xì)胞生長(zhǎng)效應(yīng)的影響呈現(xiàn)比較明顯的差異性。 品名:Ausbian精制新生牛血清 貨號(hào):VS500N 批號(hào):1712A 規(guī)格:500ml/瓶 市場(chǎng)價(jià):1600元 歡樂(lè)價(jià):800元 促銷活動(dòng):買10瓶送3瓶,100瓶送40瓶 上海威正翔禹生物公司提供的Ausbian精制新生牛血清(貨號(hào):VS500N)為澳洲進(jìn)口,血源來(lái)自新西蘭出生在4天內(nèi)的新生牛。血清經(jīng)過(guò)嚴(yán)格質(zhì)控,如檢測(cè)總蛋白、支原體、牛病毒性腹瀉病毒、牛副流感病毒等,并經(jīng)0.22m過(guò)濾和gamma射線照射,指標(biāo)達(dá)標(biāo),經(jīng)廣泛使用,受到好評(píng)。 參考文獻(xiàn) 李倬,等.促細(xì)胞生長(zhǎng)效應(yīng)試驗(yàn)對(duì)牛血清采血年齡段判定的探討.西北民族大學(xué)學(xué)報(bào).2003,24(3):59-66 |