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疫苗生產(chǎn)與無血清培養(yǎng)基

2019-06-21 09:25來源：威正翔禹|締一生物

傳統(tǒng)疫苗生產(chǎn)是采用含新生牛或小牛血清的培養(yǎng)基。含血清培養(yǎng)基有其優(yōu)點，但也有其缺點，可歸納如下：

1. 過敏問題。最后產(chǎn)品即使有很微量的天然成分，也可以引起過敏反應(yīng)和其他不安全問題。

2. 病毒問題。血清可能有帶入病毒的污染，而病毒無法用過濾的方法去除。鈷60γ射線照射可以去除支原體和病毒，但低劑量時對病毒去除得不完全，高劑量時又會對血清造成破壞，影響細(xì)胞生長。

3. 血清存在批間差異，疫苗質(zhì)量難以控制。

4. 供應(yīng)量受限。

5. 純化難度高。

6. 成分復(fù)雜，可能負(fù)向影響細(xì)胞在微載體的貼附效果。

因此后來出現(xiàn)了無血清或無蛋白、化學(xué)成分完全明確的培養(yǎng)基。HiMedia公司近日推出PK-15細(xì)胞無血清培養(yǎng)基（貨號SFM035）和MRC-5細(xì)胞無血清培養(yǎng)基（貨號SFM034），分別用于獸用疫苗和人用疫苗的生產(chǎn)。

SFM035既是無血清培養(yǎng)基，也是無動物源性成分化學(xué)限定培養(yǎng)基，不含谷氨酰胺和碳酸氫鈉。SFM035包含基礎(chǔ)培養(yǎng)基（干粉）和生長添加劑。細(xì)胞在轉(zhuǎn)為無血清培養(yǎng)基，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行逐步適應(yīng)，可按75%、50%、25%、10%、5%、1%逐步降低血清的濃度。當(dāng)細(xì)胞到達(dá)100％無血清培養(yǎng)這一步時，如果細(xì)胞在4-6天內(nèi)獲得細(xì)胞密度為1.5-2.0×106個細(xì)胞/ ml，這時即可認(rèn)為細(xì)胞已適應(yīng)無血清培養(yǎng)條件。

SFM035促細(xì)胞生長的實際效果見下圖。SFM035培養(yǎng)7天后，細(xì)胞密度顯著增加，并顯著高于競品。

20190621

細(xì)胞傳代的實驗顯示，細(xì)胞傳代5次，每次細(xì)胞密度均較穩(wěn)定，沒有顯著起伏。

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