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只用一招,簡單祛除細胞上的支原體!

2019-09-02 09:37來源:威正翔禹|締一生物


細胞培養最怕支原體污染,但有一些被污染的細胞不能被丟棄時該怎么辦?今天小編把國際上慣用的一個小絕招教給你,簡單有效!


如何祛除細胞上的支原體污染?


據研究表明,約98%的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。支原體直徑約180~350nm,比細胞小很多,經低速離心與細胞分離。通過反復懸浮沖洗、離心,加上使用我們的Zell Shield?,即可在細胞培養四代以內有效地祛除支原體。


什么是Zell Shield??

Zell Shield?是一種鏈青霉素類復合抗生素,

對細胞影響很小,可以有效抑制細胞培養中的

支原體、細菌、霉菌、真菌等微生物增殖。

普通的鏈霉素、青霉素對支原體沒有效果。


那為什么Zell Shield?有效呢?

因為Zell Shield?是由Minerva公司生產的專門針對支原體的抗生素。

德國Minerva公司是由全球**的羅伯特·科赫研究所中分離出來的,專注于支原體、細菌的污染控制,尤其以支原體和軍團菌的祛除、檢測而聞名。Zell Shield?是Minerva公司的一項**產品,不但對細胞培養中的細菌、真菌、霉菌有效,更是對支原體的祛除有確切效果。


具體是怎么操作呢?

1.首先把被支原體污染的細胞消化下來,

放入離心管離心,棄上清。

再加入干凈的PBS懸浮沖洗細胞、

低速離心(300~500r/min)、棄上清,

反復三次。

這樣可祛除細胞表面60%~70%的支原體,

支原體還剩約30%~40%.

2.細胞加入含1%Zell Shield?的新鮮培養基,

傳代培養。

這時因培養基中Zell Shield?的抑制作用

細胞培養過程中,

雖然細胞增殖,但殘留的支原體無法增殖。

細胞需再次傳代時,把第二代細胞消化下來,

離心,棄上清。

加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清,

反復三次,

這時,細胞上殘留的支原體大約已剩余為最初污染量的10%左右。

3.細胞加入含1%Zell Shield?的新鮮培養基,

傳代培養。

需再次傳代時把第三代細胞消化下來,

離心,棄上清。

加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清,

反復三次,

可再次祛除60%~70%的殘余支原體,

通過沖洗、抑制、換液等操作,

細胞中支原體的殘留污染量大約只剩3%左右。

4.細胞加入含1%Zell Shield?的新鮮培養基,

傳代培養。

需再次傳代時把第四代細胞消化下來,

離心,棄上清。

加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清,

反復三次,

可再次祛除60%~70%的支原體,

此時,支原體殘留量大約已低于1%.


支原體的增殖亦有密度要求,

用Zell Shield?處理過四代的細胞,

即便撤掉Zell Shield?,

只要保證沒有新的支原體人為再次帶入,

原有支原體也無法再增殖,

隨著傳代,換液,支原體的老化、死亡,

細胞中的支原體污染基本就徹底解決了。


敲黑板,劃重點啦


1.每次傳代時,重復三次對細胞懸浮沖洗步驟非常重要,操作要正確、規范,以達**效果!


2.在培養基中加入1%Zell Shield?抑制支原體增殖!


3.使用安全的血清、培養基等試劑,不再有新的支原體加入!


做到以上三點即可確保祛除支原體污染。


Zell Shield?工作原理是什么?

支原體祛除劑Zell Shield?(培養基用)

是一種即用型鏈青霉素類的復合抗生素,

在培養基中1%的濃度

通過阻止原核生物DNA及蛋白的合成

抑制細胞培養中遇到的

細菌、真菌、霉菌增殖,

更可以有效、精確地抑制支原體增殖,

且對細胞基本安全。

品名:支原體祛除劑Zell Shield?(培養基用)

生產商:Minerva Biolabs GmbH

生產地:德國

貨號:13-0050

規格:50mL/瓶

儲存溫度:-18℃

使用注意事項:實驗室初次使用,注意分裝,分裝后的小包裝Zell Shield?仍-20℃避光冷凍保存,現配現用。

市場價格:電話詢價

貨期:大多數時間國內有現貨

訂貨熱線:400-166-8600

咨詢QQ :1580434811

官方網址:www.klyyp.com


產品引用文獻:

(1)BennettT.A. et   al.,(2014).Pharmacological profiles of acute myeloid leukemia treatments in patient samples by automated flow cytometry:   a bridgeto individualized medicine.Clinical   Lymphoma,   Myeloma   & Leukemia, 14(4):305-18. doi: 10.1016/j.clml.2013.11.006.

(2)Cagno V. et   al., (2017).In   vitro anti-herpes   simplex   virus-2   activity   of Salvia   desoleana Atzei   &   V.   Picci essential oil. PLoS One,12(2):e0172322. doi: 10.1371/journal.pone.0172322.

(3)Carnesecchi J. et   al., (2015).Estrogens   Induce   Rapid   Cytoskeleton   Re-Organization   in   Human   Dermal Fibroblasts     via     the     Non-Classical     Receptor     GPR30. PLoS     One,10(3):e0120672. doi: 10.1371/journal.pone.0120672.