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IVP6-4濃縮型培養(yǎng)基4L配置方法

2016-05-28 10:58





IVP-6加強(qiáng)濃縮型培養(yǎng)基
4升培養(yǎng)基配制方法

包裝
每一個(gè)獨(dú)立包裝的IVP-6培養(yǎng)基均包括6個(gè)小瓶的液體。
碳酸氫鈉和谷氨酰胺需分別加入。
_____________________________________________________________________
保存
-20°C凍存為**保存狀態(tài)。
_____________________________________________________________________
準(zhǔn)備
待小瓶中的液體完全融化后,劇烈搖晃小瓶,使瓶中的液體均勻。
配制培養(yǎng)基時(shí),

1. 量出3升常溫的雙蒸水或純凈的組織培養(yǎng)水,并加入到攪拌容器中。攪拌時(shí),加入小瓶中的液體,并用常溫的雙蒸水或純凈的組織培養(yǎng)水沖洗小瓶,以確保瓶中的液體完全倒入攪拌容器中。

2. 加入1號和2號小瓶中的液體,然后,再加入9.0 g的碳酸氫鈉,待其完全溶解后,再進(jìn)行下列操作。
 建議加入谷氨酰胺的濃度為4mM (即:4升培養(yǎng)基中需加入谷氨酰胺2.3g)。注意:如培養(yǎng)基中谷氨酰胺的水平過高,會導(dǎo)致細(xì)胞有毒代謝物的生成。

3. 加入3號、4號、5號和6號小瓶中的液體,并用水量來調(diào)節(jié)最后的培養(yǎng)基體積,如有需要,可再加入二氧化碳調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值,使pH值比預(yù)期值低0.1-0.2個(gè)單位。

4. 過濾除菌后,將配制好的培養(yǎng)基置于4-8°C冰箱中避光冷藏。

注意:已過濾除菌且不含谷氨酰胺的培養(yǎng)基配制后的有效期為9個(gè)月。不要在大容器中保存少量的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基需避光保存。