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國際期刊廣泛引用的【腸桿菌科鑒定試劑盒】

2020-04-08 12:31
   腸桿菌科細菌是一大類可寄居人或動物的腸道菌。它包括眾多菌屬,如埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、沙門氏菌屬、志賀氏菌屬、克雷伯氏菌屬、變形桿菌屬等。它們在自然界分布廣泛,與人類關系密切且十分常見。它們的共同特點是:革蘭氏陰性染色、無芽胞、多數(shù)有鞭毛,能運動;營養(yǎng)要求不高:在普通培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上生長良好。大多數(shù)能發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸或產(chǎn)氣、觸酶陽性、氧化酶陰性、可將硝酸鹽還原至亞硝酸鹽等。
     盡管在我國,檢測食品衛(wèi)生的指示菌主要是大腸桿菌,但在歐洲一些國家,仍以檢測腸桿菌科為主,他們并且對我國出口食品提出檢測腸桿菌科的要求。腸桿菌科被認為更能反應食品被腸道菌污染的狀況,因為它不僅包含了大腸菌群,而且包括了許多致病菌,比起單一檢測大腸桿菌和某些特定致病菌,其更為全面。尤其是在大腸菌群不生長但存在致病菌的環(huán)境中,檢測腸桿菌科可避免由于定義不清而出現(xiàn)漏檢重要致病菌的情況;另一方面也不會出現(xiàn)大腸菌群檢驗中乳糖遲緩發(fā)酵菌株占優(yōu)導致的假陰性。

微生物鑒定在藥廠微生物檢查中占有重要位置,它有利于追溯微生物的污染源頭,及時采取防控措施,避免今后的污染。下面介紹的這款腸桿菌科鑒定試劑盒即用于疑似腸桿菌科成員的菌種鑒定,且準確率高,操作簡便,無須儀器和編碼。

中文品名:Hi25?腸桿菌科鑒定試劑盒

英文品名:Hi25? Enterobacteriaceae Identification Kit

貨號:KB003

規(guī)格:5T/盒、10T/盒、20T/盒

廠家:   HiMedia公司

用途:鑒定腸桿菌科成員(鑒定到種)


Hi25腸桿菌科鑒定試劑盒具有CE認證和FDA注冊,并被國際期刊廣泛引用,可精準鑒定腸桿菌科成員到種的水平,適合科研及食品、乳制品及制藥工業(yè)微生物鑒定使用。

1

概況:

KB003是一款全面的革蘭氏陰性腸桿菌科鑒定試劑盒。它在生化鑒定卡上每個孔內(nèi)都預置了迷你培養(yǎng)基和生化試劑,包含24項生化檢查(含13種傳統(tǒng)生化試驗和11種糖發(fā)酵試驗)??變?nèi)接種的菌液生長代謝后,導致培養(yǎng)基顏色變化。該試劑盒還提供氧化酶反應試紙,用于氧化酶的檢查。

微信圖片_20200408123224.png

圖. HiMedia生產(chǎn)的菌種生化鑒定卡示意圖


第1張鑒定卡

孔的編號

生化反應

1

ONPG試驗

2

賴氨酸脫羧試驗

3

鳥氨酸脫羧試驗

4

尿素酶活性試驗

5

苯丙氨酸脫氨試驗

6

硝酸鹽還原試驗

7

H2S產(chǎn)生試驗

8

檸檬酸利用試驗

9

伏普試驗

10

甲基紅試驗

11

吲哚試驗

12

丙二酸利用試驗


第2張鑒定卡

孔的編號

生化反應

13

七葉苷水解試驗

14

阿拉伯糖發(fā)酵試驗

15

木糖發(fā)酵試驗

16

核糖醇發(fā)酵試驗

17

鼠李糖發(fā)酵試驗

18

纖維二糖發(fā)酵試驗

19

蜜二糖發(fā)酵試驗

20

蔗糖發(fā)酵試驗

21

棉子糖發(fā)酵試驗

22

海藻糖發(fā)酵試驗

23

葡萄糖發(fā)酵試驗

24

乳糖發(fā)酵試驗

25

氧化酶紙片試驗


2

使用說明:

1)純菌培養(yǎng)

待鑒定菌種應先進行分離和純化??稍跔I養(yǎng)瓊脂(貨號M001/貨號M1274)或鑒別培養(yǎng)基如麥康凱瓊脂(貨號M082)上挑取一個菌落,接種在5ml腦心浸膏肉湯中,35-37℃培養(yǎng)4-6小時,直到在620nm處,接種液濁度≥0.1OD或0.5 McFarland標準。一些苛養(yǎng)菌可能需要6小時以上的孵育時間,以保證接種液濁度≥0.1OD


2)氧化酶實驗

采用試劑盒提供的氧化酶紙片(貨號DD018)進行氧化酶檢查。挑取一個菌落,接觸和摩擦氧化酶紙片。10秒內(nèi)出現(xiàn)深紫色為陽性反應。10秒-60秒出現(xiàn)顏色變化表明為延遲的陽性反應。60秒后出現(xiàn)顏色變化或無變化為陰性反應。氧化酶試驗必須完成,它是整個鑒定體系的一部分。


3)接種菌液并培養(yǎng)

無菌環(huán)境下打開試劑盒,撕掉封條。在生化鑒定卡上每孔接種50μl上述菌液。也可用接種環(huán)劃線。35℃-37℃孵育18-24小時。


4)添加輔助試劑

以下試驗在18-24小時孵育期結(jié)束后,添加如下輔助試劑(試劑盒提供輔助試劑)。

a.苯丙氨酸脫氨試驗:第5個孔

加2-3滴TDA試劑(貨號R036)。1分鐘內(nèi)出現(xiàn)深綠色為陽性。無顏色變化為陰性。


b.硝酸鹽還原試驗:第6個孔

加1-2滴對氨基苯磺酸(貨號R015)和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺(貨號R009)立即出現(xiàn)粉紅色為陽性,顏色無變化為陰性。


c.伏-普試驗:第9個孔

加2-3滴Barritt試劑A(貨號R029)和1滴Barritt試劑B(貨號R030)5-10分鐘內(nèi)出現(xiàn)粉紅色為陽性,無顏色變化或為淺銅色為陰性。


d.甲基紅試驗:第10個孔

加1-2滴甲基紅試劑(貨號I007)

試劑保持紅色為陽性

試劑脫色變黃為陰性


e.吲哚試驗:第11個孔

加1-2滴Kovac試劑(貨號R008)。10秒內(nèi)出現(xiàn)粉紅色為陽性。試劑保持淺白色為陰性。


5)讀取結(jié)果

顯色結(jié)果與《結(jié)果詮釋表》比對,確定是否存在陽性反應。再根據(jù)《菌種標準表》完成鑒定。

3

可鑒定的腸桿菌科菌種:

水生布戴約維采菌(Budvicia aquatica)

鄉(xiāng)間布丘氏菌(Buttiauxella agrestis)

戴氏西地西菌(Cedecea davisae)

拉氏西地西菌(Cedecea lapagei)

奈氏西地西菌(Cedecea neteri)

無丙二酸檸檬酸桿菌(Citrobacter amalonaticus)

差異檸檬酸桿菌(Citrobacter diversus)

弗氏檸檬酸桿菌(Citrobacter freundii)

產(chǎn)氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes)

河生腸桿菌生物1群(Enterobacter amnigenus (Biogroup I)

河生腸桿菌生物2群(Enterobacter amnigenus (Biogroup II)

泰勒腸桿菌或生癌腸桿菌Enterobacter taylorae (E. cancerogenus)

陰溝腸桿菌(Enterobacter cloacae)

日溝維腸桿菌(Enterobacter gergoviae)

阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii)

大腸埃希氏菌(Escherichia coli)

非活潑型大腸埃希氏菌Escherichia coli, inactive)

螳螂埃希氏菌(Escherichia blattae)

弗格森埃希氏菌(Escherichia fergusonii)

赫爾曼埃希氏菌(Escherichia hermanii)

傷口埃希菌(Escherichia vulneris)

美洲愛文菌(Ewingella americana)

蜂房哈夫尼菌(Hafnia alvei)

產(chǎn)酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)

肺炎克雷伯菌臭鼻亞種Klebsiella pneumoniae subspecies ozaenae

肺炎克雷伯菌肺炎亞種(Klebsiella pneumoniae subspecies pneumoniae)

肺炎克雷伯菌鼻硬結(jié)亞種(Klebsiella pneumoniae subspecies rhinoscleromatis)

土生克雷伯氏菌(Klebsiella terrigena)

抗壞血酸克呂沃菌(Kluyvera ascorbata)

非脫羧勒克氏菌(Leclercia adecarboxylata (Escherichia adecarboxylata) )

摩氏摩根菌摩氏亞種(Morganella morganii subspecies morganii)

摩氏摩根菌塞氏亞種(Morganella morganii subspecies sibonii)

成團泛菌(Pantoea agglomerans)

分散泛菌(Pantoea dispersa)

奇異變形桿菌(Proteus mirabilis)

產(chǎn)粘變形桿菌(Proteus myxofaciens)

潘尼變形桿菌(Proteus penneri)

普通變形桿菌(Proteus vulgaris)

產(chǎn)堿普羅維登斯菌(Providencia alcalifaciens)

雷極普羅維登斯菌(Providencia rettgeri)

拉氏普羅維登斯菌(Providencia rustigianii)

水生拉恩菌(Rahnella aquatilis)

邦戈爾沙門氏菌(Salmonella bongori)

豬霍亂沙門氏菌亞利桑那亞種(Salmonella choleraesuis subspecies arizonae)豬霍亂沙門氏菌豬霍亂亞種(Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis)

豬霍亂沙門氏菌雙相亞利桑那亞種(Salmonella choleraesuis subspecies diarizonae)

豬霍亂沙門氏菌豪頓亞種(Salmonella choleraesuis subspecies houtenae)

豬霍亂沙門氏菌印度亞種(Salmonella choleraesuis subspecies indica)

豬霍亂沙門氏菌薩拉姆亞種(Salmonella choleraesuis subspecies salamae)

腸炎沙門氏菌(Salmonella enteritidis)

傷寒沙門氏菌(Salmonella typhi)

鼠傷寒沙門氏菌Salmonella typhimurium

蟲媒沙雷菌(Serratia entomophila)

無花果沙雷菌(Serratia ficaria)

居泉沙雷菌(Serratia fonticola)

粘質(zhì)沙雷菌(Serratia marcescens)

氣味沙雷菌1型(Serratia odorifera 1)

氣味沙雷菌2型(Serratia odorifera 2)

普城沙雷菌(Serratia plymuthica)

變形斑沙雷菌(Serratia proteamaculans)

深紅沙雷菌(Serratia rubidaea)

鮑氏志賀氏菌、福氏志賀氏菌、痢疾志賀氏菌(Shigella boydii, Shigella flexneri, Shigella dysenteriae)

宋內(nèi)氏志賀菌(Shigella sonnei)

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌(Yersinia enterocolitica)

費氏耶爾森菌(Yersinia frederiksenii)

中間耶爾森菌(Yersinia intermedia)

鼠疫耶爾森菌(Yersinia pestis)

假結(jié)核耶爾森氏菌(Yersinia pseudotuberculosis)

4

保存條件及保質(zhì)期

2℃-8℃;12個月



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HiMedia介紹

HiMedia廠家,它成立于1975年,近50年一直致力于微生物培養(yǎng)基和細胞培養(yǎng)基的研發(fā)和生產(chǎn)。有1500多種無動物源培養(yǎng)基,3000多種微生物培養(yǎng)基,幾百種細胞培養(yǎng)基,產(chǎn)品線齊全,質(zhì)控嚴格。微生物快檢產(chǎn)品,植物源培養(yǎng)基,菌種鑒別產(chǎn)品,全球遙遙領先。其產(chǎn)品行銷全球140多個國家。已通過WHO GMP認證,并具有ISO9001:2008,ISO13485:2003認證,CE認證和FDA注冊登記。



中國合作伙伴介紹

北京締一生物作為HiMedia公司的總代理,在2015年將HiMedia產(chǎn)品正式引入中國。北京締一生物被中國生物界譽為值得“持續(xù)信賴的供貨商”,在微生物檢測領域有著專業(yè)的技術背景,為中國的食品廠、乳制品廠、藥廠、疫苗廠等,提供專業(yè)的技術支持和產(chǎn)品。