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選低內毒素血清——養高品質細胞的秘密2020-04-22 11:44來源:威正翔禹|締一生物
牛血清作為天然培養基,在細胞培養中占有重要的位置。但同時由于其采血過程的復雜性,需避免受到外源性污染。 【內毒素】原本是革蘭氏陰性菌的細胞壁外壁層上的特有結構,主要化學成分是脂多糖中的類脂A成分。 內毒素在細胞傳代增殖過程中,會直接參與細胞凋亡的過程,一定劑量下,會給細胞培養帶來很多問題,特別是免疫細胞和干細胞,例如:誘導免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。 因此,血清中內毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;反之,內毒素含量過高,會直接導致細胞狀態不良,提前老化,甚至死亡。 關于內毒素 基于以上研究,用于細胞培養的牛血清,要通過嚴格的內毒素水平檢測,每一批血清都有完整的檢測報告,通過內毒素的檢測數值,對血清的品質進行分級和評估。 目前國際通用的分級方法,均以內毒素含量的高低來確定,內毒素含量越低,血清的級別就越高,以胎牛血清為例, 當血清中內毒素含量≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清; 當血清中內毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時,此血清為優級胎牛血清; 當血清中內毒素含量≥25EU/ml時,此血清為標準級胎牛血清; Ausbian?品牌的進口系列牛血清,目前均來自澳洲,(后期亦有可能增加南美進口來源),均經過嚴格篩選,只挑選內毒素極低的特級血清進口到中國。 種類包括:特級胎牛血清、特級新生牛血清、疫苗專用特級新生牛血清,細胞治療專用胎牛血清等。 所有批次內毒素都低于3EU/ml,其中有的批次可以低至≤1EU/ml。更低的內毒素血清,更利于細胞的生長和傳代。 例如:干細胞體外培養實驗,由于干細胞的原始性,它們對內毒素非常敏感,所以,當血清內毒素偏高時,細胞很容易死亡,需要在試用前提早參看該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。 又例如:基因敲除相關的細胞實驗,培養的細胞要盡可能保持其原始狀態,任何引導細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續的實驗結果“失之毫厘,謬以千里”。所以,選擇極低內毒素的血清,至關重要。 同樣,例如:原代培養,雜交瘤融合,細胞轉染,難養細胞在體外的增殖(肝細胞,神經細胞,內皮細胞等)....這些細胞的培養都需要內毒素更低的血清,如果內毒素過高,對細胞造成的損害,會大大影響后續實驗結果。 還有一些細胞,實驗室比較常用,經常復蘇,培養,凍存,如此,血清會經常作用于細胞;還有的細胞需要培養的時間較長,血清會長時間作用于細胞;還有細胞典藏等項目,都需要使用更低內毒素的血清,以避免內毒素長久對細胞的毒性影響。 1. 保證全程冷鏈運輸,國外加干冰進中國后直接在海關進冷凍庫,不出現凍融現象,保證質量不受影響,因為我們是在海關備案,有相關文件,正規途徑進口,如果不按正規途徑進血清,會進常溫庫,血清凍融導致實驗問題,或者同一批貨周圍的血清和中間的血清質量差異明顯。
8. 同一個批次數量多,2000瓶,可以長期不用換批次。保證了實驗更加順利的同時,節省了試用的時間和成本。 9. 多個批次可以選擇。不限一次試用,可以適應不同課題。以保障實驗順利。 北京締一生物作為Ausbian?血清的總代理。被中國生物界譽為值得“持續信賴的供貨商”,在細胞生物學領域有著專業的技術背景,為中國的基礎科研、疫苗生產、細胞產品開發等,提供專業的技術支持和產品。 上一篇: 淺談【透析胎牛血清】的工藝和應用
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