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避免小分子的干擾——用透析胎牛血清2020-07-07 15:16來源:威正翔禹|締一生物
避免小分子的干擾,用透析胎牛血清 胎牛血清是營養豐富的天然培養基,常用于細胞培養。但有一些特殊的細胞實驗,需要避免細胞培養基中一些小分子對實驗的干擾。這時,就需要使用透析胎牛血清。 透析胎牛血清是采用透析的方法,過濾去除10KDa以下的小分子(如氨基酸、核苷、膽固醇等),而保留血清中的大分子成分,因而可用于一些特定的細胞實驗。 例如,使用放射性標記小分子,對生物合成過程進行監測,以研究蛋白質等大分子的生化性質、合成、加工、細胞內傳送、分泌和降解過程。這時,常將細胞放在含有充足養分和放射性標記氨基酸(如35S標記的蛋氨酸或半胱氨酸)的培養液中進行標記。為避免外源未標記的氨基酸的干擾,這時所用的血清就是透析胎牛血清,不含蛋氨酸和半胱氨酸,基礎培養基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。 圖.同位素示蹤實驗 這種方法常見于生化代謝調控與疾病的機理研究。其他常見標記物包括14C標記的絲氨酸、亮氨酸、纈氨酸或32P標記的焦磷酸,這時培養液中的基礎培養基和胎牛血清都要求不含有這種小分子。 另一種需要用到透析胎牛血清的情況是穩定轉染的細胞株的篩選。最常見的基因工程用細胞株是二氫葉酸還原酶缺陷型(DHFR-)的CHO細胞。CHO(DHFR-)細胞由于不含DHFR,因而只能在含有胸苷、甘氨酸和次黃嘌呤的培養基中才能生長。若將DHFR基因導入這種缺陷型細胞,則細胞能在不含這三種分子的培養液中生長。同時,加入氨甲喋呤(MTX)可刺激DHFR基因大量表達,與之一同轉染的外源基因就能大量表達,因而可以獲得人們所需的基因工程藥物。類似的情況也見于雜交瘤細胞的篩選。 第三種情況是采用報告基因檢測系統(常見熒光素酶作為報告基因)進行基因調控的研究時,為避免特定外源小分子(如葡萄糖、激素等)作為基因激動劑的干擾,即需要透析胎牛血清來培養基因轉染后的細胞。 下面介紹一款市面上低調的透析胎牛血清-Ausbian品牌 Ausbian?透析特級胎牛血清為澳洲進口,是在當地政府獸醫部門的監督下從注冊的出口屠場采集,國際GMP品質生產,嚴格質控,符合國際動物協會要求。 產品描述 1.內毒素更低(<3.0 EU/mL),細胞培養過程更健康。 2.在Ausbian?特級胎牛血清基礎上,透析去除10000分子量以下小分子,使細胞試驗免除外源小分子干擾。 3. 每批都有提供詳盡的檢測報告,各項檢測指標完整,清晰,實驗人員一目了然。 4.從出廠到實驗室,全程冷鏈運輸,不出現凍融現象,血清質量能保證。 5.有100ml和500ml大小兩種包裝,實驗人員選擇更方便。 6.原裝進口的Ausbian透析胎牛血清,到達國內后現貨才開始銷售,實驗室沒有國際貨運風險。 除了以上小編推薦的產品以外,Ausbian?血清還有:特級胎牛血清、細胞治療專用胎牛血清、疫苗生產專用胎牛血清、疫苗生產專用新生牛血清、進口特級新生牛血清等一系列產品供客戶選擇。 |