避免小分子的干擾——用透析胎牛血清

避免小分子的干擾，用透析胎牛血清

胎牛血清是營養(yǎng)豐富的天然培養(yǎng)基，常用于細(xì)胞培養(yǎng)。但有一些特殊的細(xì)胞實驗，需要避免細(xì)胞培養(yǎng)基中一些小分子對實驗的干擾。這時，就需要使用透析胎牛血清。

透析胎牛血清是采用透析的方法，過濾去除10KDa以下的小分子（如氨基酸、核苷、膽固醇等），而保留血清中的大分子成分，因而可用于一些特定的細(xì)胞實驗。

例如，使用放射性標(biāo)記小分子，對生物合成過程進(jìn)行監(jiān)測，以研究蛋白質(zhì)等大分子的生化性質(zhì)、合成、加工、細(xì)胞內(nèi)傳送、分泌和降解過程。這時，常將細(xì)胞放在含有充足養(yǎng)分和放射性標(biāo)記氨基酸（如35S標(biāo)記的蛋氨酸或半胱氨酸）的培養(yǎng)液中進(jìn)行標(biāo)記。為避免外源未標(biāo)記的氨基酸的干擾，這時所用的血清就是透析胎牛血清，不含蛋氨酸和半胱氨酸，基礎(chǔ)培養(yǎng)基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。

圖.同位素示蹤實驗

這種方法常見于生化代謝調(diào)控與疾病的機(jī)理研究。其他常見標(biāo)記物包括14C標(biāo)記的絲氨酸、亮氨酸、纈氨酸或32P標(biāo)記的焦磷酸，這時培養(yǎng)液中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和胎牛血清都要求不含有這種小分子。

另一種需要用到透析胎牛血清的情況是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株的篩選。最常見的基因工程用細(xì)胞株是二氫葉酸還原酶缺陷型（DHFR-）的CHO細(xì)胞。CHO（DHFR-）細(xì)胞由于不含DHFR，因而只能在含有胸苷、甘氨酸和次黃嘌呤的培養(yǎng)基中才能生長。若將DHFR基因?qū)脒@種缺陷型細(xì)胞，則細(xì)胞能在不含這三種分子的培養(yǎng)液中生長。同時，加入氨甲喋呤（MTX）可刺激DHFR基因大量表達(dá)，與之一同轉(zhuǎn)染的外源基因就能大量表達(dá)，因而可以獲得人們所需的基因工程藥物。類似的情況也見于雜交瘤細(xì)胞的篩選。

第三種情況是采用報告基因檢測系統(tǒng)（常見熒光素酶作為報告基因）進(jìn)行基因調(diào)控的研究時，為避免特定外源小分子（如葡萄糖、激素等）作為基因激動劑的干擾，即需要透析胎牛血清來培養(yǎng)基因轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞。

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Ausbian?透析特級胎牛血清為澳洲進(jìn)口，是在當(dāng)?shù)卣F醫(yī)部門的監(jiān)督下從注冊的出口屠場采集，國際GMP品質(zhì)生產(chǎn)，嚴(yán)格質(zhì)控，符合國際動物協(xié)會要求。

產(chǎn)品描述

1．內(nèi)毒素更低（<3.0 EU/mL），細(xì)胞培養(yǎng)過程更健康。

2．在Ausbian?特級胎牛血清基礎(chǔ)上，透析去除10000分子量以下小分子，使細(xì)胞試驗免除外源小分子干擾。

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