談?wù)_使用胎牛血清

【胎牛血清】是細(xì)胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基。

它是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(zhǎng)分化階段，血中含有豐富的生長(zhǎng)發(fā)育因子，非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng)。

因此，如何在使用過程中保護(hù)這些因子的活性，達(dá)到**的細(xì)胞培養(yǎng)效果，就需要正確地使用胎牛血清。

正確地使用胎牛血清可分為以下四個(gè)方面：

1.   正確儲(chǔ)存，避免反復(fù)凍融

1)   血清在-20°C凍存。

2)   血清避免反復(fù)凍融，以免降低因子活性。如一次用不完，應(yīng)進(jìn)行分裝。

3)   血清和培養(yǎng)基應(yīng)盡可能“現(xiàn)用現(xiàn)配”，配好的培養(yǎng)液，應(yīng)于一周內(nèi)用完。

4)   血清避免在4°C或更高溫度靜置過久，否則會(huì)破壞血清中有效活性成分，影響血清品質(zhì)。

2. 正確的融化

國(guó)際上流行的【血清融化三步法】可**限度地保存血清中因子的活性，不會(huì)產(chǎn)生沉淀，同時(shí)能縮短血清融化時(shí)間。具體如下：

3. 關(guān)于胎牛血清的滅活

真正的胎牛血清因?yàn)樘ヅ]有形成有效補(bǔ)體，如果針對(duì)補(bǔ)體滅活的話，就不需要。其他情況根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來決定。

4. 胎牛血清的濃度

胎牛血清通常是以2%～20%的比例加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，混合后配成完全培養(yǎng)基。

曾有文獻(xiàn)報(bào)道，不同胎牛血清濃度對(duì)細(xì)胞存在一定的影響，尤其是干細(xì)胞和原代細(xì)胞。具體**濃度需要用戶根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)來確定，以既保證培養(yǎng)的效果，又避免血清的浪費(fèi)。

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