中國藥典可能面臨修改：關(guān)于生物制品中的支原體檢測

　　2017年6月28日 威正翔禹生物viansaga導(dǎo)讀：中國藥典可能面臨修改：關(guān)于生物制品中的支原體檢測

　　小編今日看到一篇文章，是《中國生物制品學(xué)雜志》2015年8月第28卷第8期上的《中國生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)污染支原體類型的分析及豬鼻支原體特異性檢測方法的初步建立》，大吃一驚，《中國藥典》2015年檢測生物制品中的支原體所用的方法，可能要面臨修改，因為用培養(yǎng)基分離培養(yǎng)來檢測支原體的方法，對某些支原體，可能根本測不出來！

　　這篇文章的兩個作者都是來自中國食品藥品檢定研究院。文章作者提到：“用于生物制品生產(chǎn)的細(xì)胞基質(zhì)或治療性細(xì)胞產(chǎn)品被支原體污染后，支原體或支原體代謝產(chǎn)物可進(jìn)入人體，并對人體產(chǎn)生嚴(yán)重危害。因此，對支原體污染的有效檢測是確保細(xì)胞基質(zhì)及治療性細(xì)胞產(chǎn)品質(zhì)量的前提”。

　　又“據(jù)估計，世界范圍內(nèi)約15%～50%的保藏細(xì)胞受支原體污染。據(jù)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院細(xì)胞中心統(tǒng)計，其2001-2004 年間檢測的不同來源細(xì)胞支原體污染率高達(dá)約60%。引起體外細(xì)胞污染的支原體主要有口腔支原體、發(fā)酵支原體、豬鼻支原體、萊氏無膽甾原體等。”“體外培養(yǎng)細(xì)胞支原體傳統(tǒng)檢測方法為培養(yǎng)法和指示細(xì)胞染色法，這兩種方法是目前世界藥品監(jiān)督管理機構(gòu)或組織普遍認(rèn)可的檢定方法，即”藥典方法“。但其缺點是耗時長，靈敏度低，這也是目前體外培養(yǎng)細(xì)胞支原體污染檢出率高低差異較大（5%-87%）的主要原因”。

　　作者對中國食品藥品檢定研究院細(xì)胞資源保藏及研究中心收集的70份細(xì)胞基質(zhì)培養(yǎng)上清進(jìn)行了檢測。這70份樣品已通過培養(yǎng)法及染色法證實存在了支原體污染。這回作者發(fā)現(xiàn)其中49份為豬鼻支原體污染。該報道**揭示了豬鼻支原體是導(dǎo)致我國生物制品生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)污染最常見的支原體類型。

　　但“豬鼻支原體對生長培養(yǎng)基的營養(yǎng)要求較為苛刻，需要寄生在培養(yǎng)細(xì)胞上攝取膽固醇和發(fā)酵葡萄糖，而目前《中國藥典》三部（2010 版）支原體培養(yǎng)法要求使用的支原體肉湯培養(yǎng)基及精氨酸支原體肉湯培養(yǎng)基中均不含上述兩種營養(yǎng)物質(zhì)。因此，理論上培養(yǎng)法無法檢測出豬鼻支原體污染，僅能通過指示細(xì)胞感染及染色法進(jìn)行檢測，但該方法操作繁瑣，實驗過程中的指示細(xì)胞狀態(tài)和細(xì)胞固定及染色的質(zhì)量均會對檢測結(jié)果的判定產(chǎn)生影響，更重要的是該方法缺乏特異性。”

　　因此，大力發(fā)展或采用PCR的方法進(jìn)行生物制品中支原體污染的檢測勢在必行。歡迎采用德國Minerva公司（研究人員來自德國羅伯特·科赫微生物研究所）研制的VenorGeM支原體檢測試劑盒，廣譜、特異，靈敏度高。該系列試劑盒共有四種，其中經(jīng)典法和熒光定量法已早被歐洲藥典批準(zhǔn)，可放心使用。