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簡析透析胎牛血清的應(yīng)用

2020-08-21 15:47來源:威正翔禹|締一生物

胎牛血清常用于細(xì)胞培養(yǎng)。但有一些實驗則需要透析胎牛血清。


下面小編就來和大家講一下透析胎牛血清。


透析胎牛血清和胎牛血清的**區(qū)別是,前者透析祛除了分子量在1萬以下的小分子,如葡萄糖、鹽、氨基酸、激素,此外在其他工藝方面沒有任何區(qū)別。

透析胎牛血清也是用于細(xì)胞培養(yǎng),但同時,又有自己的一些特殊應(yīng)用。其用途可歸納如下:


一、摻入研究

例如:有人研究呼吸道合胞病毒的宿主特異性:即為什么它只感染呼吸道上皮細(xì)胞,而不感染其他細(xì)胞。

他們將該病毒的F蛋白(融合蛋白)序列克隆入質(zhì)粒內(nèi),并轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞。轉(zhuǎn)染后第20小時,細(xì)胞先在不含蛋氨酸和半胱氨酸的DMEM+透析胎牛血清中培養(yǎng)了45分鐘(讓細(xì)胞處于饑餓狀態(tài),因培養(yǎng)基中缺少氨基酸),再在同樣上述培養(yǎng)基中培養(yǎng),但添加了35S標(biāo)記的蛋氨酸和半胱氨酸。


培養(yǎng)4小時后進(jìn)行分析。即裂解細(xì)胞后,用抗F蛋白的抗體捕獲F蛋白、跑膠并進(jìn)行放射自顯影,分析F蛋白的表達(dá)情況。發(fā)現(xiàn)F蛋白的表達(dá)確實增加了,但突變后的F蛋白表達(dá)卻無任何變化。結(jié)果證實,野生型的F蛋白確實參與病毒對宿主細(xì)胞的侵襲。

值得指出的是,用35S標(biāo)記的蛋氨酸和半胱氨酸用來標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)的蛋白,結(jié)合免疫沉淀用于觀察在某一過程中發(fā)生的某一蛋白的變化,從而發(fā)現(xiàn)該蛋白所扮演的角色,的確是一個普遍有效的方法(在研究信號分子磷酸化的方面,則需要使用32P標(biāo)記的磷酸鹽)。


在這其中,透析胎牛血清的使用必不可少,即給細(xì)胞創(chuàng)造一個無外源氨基酸干擾的環(huán)境。


二、細(xì)胞水平的藥物篩選

例如:有人要從化合物庫中篩選S1P4受體的拮抗劑,以抑制流感病毒帶來的免疫激活導(dǎo)致的肺損傷。他采用報告基因進(jìn)行監(jiān)測。為了避免細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中存在的小分子的干擾,他也需要用10%的透析胎牛血清加McCoy's 5A培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。


類似在藥物研發(fā)過程中,采用特定啟動子操縱的熒光素酶報告基因,基于細(xì)胞平臺的高通量藥物篩選,也都需要無外源小分子的培養(yǎng)體系,因而也要用透析胎牛血清。


三、細(xì)胞克隆的篩選

包括雜交瘤細(xì)胞和CHO細(xì)胞等,由于在進(jìn)行細(xì)胞篩選時,需要無外源小分子如次黃嘌呤和胸腺嘧啶等的干擾,因此也需要用到透析胎牛血清。

目前市面上有一款低調(diào)的透析胎牛血清進(jìn)口品牌Ausbian。它在近些年備受實驗人員青睞。下面給您介紹一下:


中文名:Ausbian?透析胎牛血清

英文:Fetal Bovine Serum Sterile Filtered, Dialyzed

品牌:Ausbian?

產(chǎn)地:澳洲

貨號:VS100TZ,VS500TZ

批號:見瓶身

規(guī)格:100ml/瓶,500ml/瓶

Ausbian?透析胎牛血清為澳洲進(jìn)口,是在當(dāng)?shù)卣F醫(yī)部門的監(jiān)督下從注冊的出口屠場采集,國際GMP品質(zhì)生產(chǎn),嚴(yán)格質(zhì)控,符合國際動物協(xié)會要求。


產(chǎn)品描述

1.在Ausbian?特級胎牛血清基礎(chǔ)上,透析過濾去除10KDa以下小分子,避免外源小分子對細(xì)胞的干擾。

2.精選內(nèi)毒素更低批次,細(xì)胞更健康。

3. 每個批次提供完整的檢測報告。

4.全程冷鏈運輸,不出現(xiàn)凍融現(xiàn)象,保證質(zhì)量不受影響。

5.100毫升,500毫升多種包裝選擇,適合不同實驗用量需求。

6.國內(nèi)現(xiàn)貨儲備,避免國際貨運風(fēng)險。