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正確使用血清方法2020-09-04 15:20來源:威正翔禹|締一生物
實驗室使用的血清一般為牛血清,由于其產品大制作工藝相對成熟頗受青睞。【胎牛血清】是細胞培養中重要的天然培養基。 它是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發育因子,非常適合各種細胞的培養。 因此,如何在使用過程中保護這些因子的活性,達到**的細胞培養效果,就需要正確地使用胎牛血清。 正確地使用胎牛血清可分為以下四個方面: 1. 正確儲存,避免反復凍融 1)血清在-20°C凍存。 2)血清避免反復凍融,以免降低因子活性。如一次用不完,應進行分裝。 3) 血清和培養基應盡可能“現用現配”,配好的培養液,應于一周內用完。 4)血清避免在4°C或更高溫度靜置過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質。 2. 正確的融化 國際上流行的【血清融化三步法】可**限度地保存血清中因子的活性,不會產生沉淀,同時能縮短血清融化時間。具體如下: 3. 關于胎牛血清的滅活 真正的胎牛血清因為胎牛沒有形成有效補體,如果針對補體滅活的話,就不需要。其他情況根據實驗設計來決定。 4. 胎牛血清的濃度 胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基礎培養基中,混合后配成完全培養基。 曾有文獻報道,不同胎牛血清濃度對細胞存在一定的影響,尤其是干細胞和原代細胞。具體**濃度需要用戶根據自己的實驗來確定,以既保證培養的效果,又避免血清的浪費。 下一篇: 完美解決血清沉淀問題
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