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支原體篩查用 qPCR檢測試劑盒

2020-09-28 14:04來源:威正翔禹|締一生物

細胞培養(yǎng)時,支原體污染是一個常見的問題,它會帶來如下危害。

由于支原體污染無法肉眼識別,因此應定期采用試劑盒對細胞培養(yǎng)物中的支原體進行監(jiān)測。


世界**微生物控制公司Minerva Biolabs開發(fā)有Venor? Gem系列的支原體檢測試劑盒(核酸法),靈敏度高,特異性好,廣受科研和工業(yè)用戶的歡迎。


其中,Venor?Gem qOneStep,即支原體熒光定量PCR檢測試劑盒(一步法)適用于細胞培養(yǎng)物、細胞培養(yǎng)基及其他生物基質(zhì)中的支原體污染的篩查(非放行檢測)。


和PCR比起來,qPCR無需跑電泳,使用時更為便捷,對實驗人員更安全。


現(xiàn)對該試劑盒作一簡單介紹:

一、產(chǎn)品信息

二、產(chǎn)品描述

試劑盒包含有1管預混液。預混液內(nèi)含引物對、核苷酸、內(nèi)控對照和聚合酶。另含有1管陽性對照DNA。兩管均為凍干粉,使用時復溶即可。整個qPCR檢測小于3小時。


三、產(chǎn)品特點

①內(nèi)控對照已加在預混液中,無需另外配制,使用便捷。

②高特異性,一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種(包括歐洲藥典規(guī)定的9種支原體)。與細菌和真核DNA無交叉反應。

③高靈敏度,至少50個基因組拷貝/反應。


四、操作步驟


第1步:樣本處理

第2步:試劑制備

第3步:qPCR體系建立

第4步:啟動qPCR反應

第5步:結(jié)果判別

FAM通道:檢測支原體熒光信號。

HEX通道:檢測內(nèi)控對照熒光信號。

支原體DNA和內(nèi)控DNA存在信號的競爭性抑制。

支原體DNA越多,F(xiàn)AM通道信號越高,檢測內(nèi)控對照的HEX通道信號越低。

定量需基于Ct值和DNA標準曲線。

Ct<40為陽性結(jié)果。Ct≥40為陰性結(jié)果。

示意圖: