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血清對背根神經節細胞的保護作用

2020-12-22 16:24來源:威正翔禹|締一生物

背根神經節是位于脊椎間孔內、靠近脊髓的神經結節。它負責向脊髓傳遞各種感覺信號,如溫度覺、觸覺、痛覺等。


背根神經節細胞的體外培養可用于研究神經軸突再生,從而有助于脊髓損傷的治療。

在研究神經軸突再生機制時,電穿孔轉染siRNA 或質粒是一種重要的研究方法。

對于神經元細胞,電傳孔轉染效率顯著高于其他方法,但對細胞可能有一定損傷。

2020年9月,《中國組織工程研究》期刊在線發表了《無血清培養基和有血清培養基對背根神經節生長的差異》的研究,揭示出在電轉條件下,血清對背根神經節的體外培養有重要作用,因此無血清培養基無法取代有血清培養基。

該研究即將刊登在2021年第13期的紙質版期刊上。


研究人員取出小鼠的背根神經節組織,用膠原酶消化后,分別用含5%胎牛血清的MEM培養基和無血清的MEM培養背根神經節細胞。


同時,用電傳孔方法轉染增強型綠色熒光蛋白(EGFP) 質粒至細胞內。


培養3天后,觀察在光鏡下觀察細胞形態及生長狀況,并進行神經元標志物染色,在熒光顯微鏡下觀察,并測量軸突長度。


結果顯示:


1在電轉和非電轉條件下,無血清并不影響背根神經節細胞的軸突再生的長度和軸突的分支。

圖片

2在電轉的條件下,背根神經節神經元的存活數均減少,且電轉無血清組的細胞存活數比電轉有血清組明顯減少。

3無論是否有血清,電傳孔傳染效率均為20%左右。


該研究揭示出,電轉對神經細胞存在一定的損傷,但血清對細胞有明顯的保護作用。該結論也可能適用于其他細胞類型。

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北京締一生物科技有限公司

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