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血清使用小技巧 | 如何保證血清活性?解凍和儲存方法很重要!2021-09-23 11:06來源:威正翔禹|締一生物
剛到貨的血清應該怎樣儲存? 血清到底要怎樣解凍才能保證活性? 血清在4℃冰箱能放多久? 作為一名細胞培養大戶,你是不是經常會糾結上面這些問題?畢竟血清這種金貴的東西,可得好好珍惜,一個不小心,就可能導致實驗失敗,免不了要被導師責備。 那這些問題到底應該怎樣解決?有沒有標準答案?身為一個資深的代理商,關于血清的儲存和解凍問題我們可是有好好研究過的。 如果你也存在同樣的疑惑,那就請接著往下看吧。 Notice 常規儲存 首先,剛到貨的血清,趁著它還凍手,趕緊放進-20℃冰箱中,避免反復凍融。當然,如果你的課題組不差錢,-80℃冰箱空間充足,把血清儲存進去也是沒有問題的。 Notice 如何解凍 很多同學會說,不就是解凍血清嘛,這題我會! emmm……怎么說呢,直接在4℃冰箱里過夜融化的方法,雖然很多人在這么用,但還是有一些潛在的風險的。
我們都知道,在血清這種混合物中,融化速度:蛋白質等干物質>水這類溶劑,所以蛋白質會率先溶解析出,而水還是結成冰的狀態,導致瓶子中間會出現一根透明的冰柱,而周圍則會呈現上黃下紅的分層渾濁液的狀態,在使用過程中很容易引起沉淀、混合不均勻、局部濃度過高等問題,影響細胞生長。
更重要的一點是,血清中珍貴的生長因子等活性物質,它們在解凍過程中,有著與細胞復蘇類似的經歷,都需要快速解凍才能**程度地保留生物活性。顯然,4℃過夜這樣的長時間處理,很有可能會導致一部分「營養成分」的損失,影響細胞生長。 所以,為了更好地保留血清中的活性成分,使細胞培養更穩定,我們推薦使用三步法溶解,具體方法見下表,有需要的同學可以截圖保存。
如果是儲存在-80℃的血清,則需提前幾天先轉移至-20℃冰箱中(至少24小時),再使用三步法溶解,避免溫差過大使血清失活。 注:此方法國際通用,適用于所有培養基,在水浴過程中,血清的平面要完全浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動瓶身,使血清混勻,但搖動中盡量不要產生泡沫! 徹底解凍血清后,可以根據實驗需求,將其分裝,保證每一份夠一次使用量即可,比如:25ml/管、50ml/管等。密封好后趕緊放回-20℃冰箱繼續儲存。需要配制培養基的時候,再從-20℃冰箱中取出一管來解凍使用(**能全部配成培養基,不要有剩余),可以有效避免反復凍融的問題(遵循現用現配、現配現解凍的原則)。配好的培養基可以放到4℃冰箱進行儲存。 Notice 4℃存放時間 看到這里,問題又來了,配好的培養基,或者剩下的那一點點血清,能在4℃冰箱里放多久呢?
先給出我們認為比較合理的答案,再來解釋原因: 一般情況下,已經解凍的血清,無論是配成完全培養基還是在冰箱里備用,都不要超過一周(7天),原因也很簡單,存放太久,生長因子等物質容易失活,而且比較容易受到污染,影響實驗結果。 不知道今天這期內容有沒有解決大家的疑惑,無論是國產還是進口血清,都不算便宜,這么貴巴巴的試劑,還請小心使用,讓它們的功效**化,可不能讓銀子白花! Notice 如果你對該產品感興趣,想要了解更多,歡迎訪問 北京締一生物官網:www.dyshengwu.com 或聯系北京締一生物公司 咨詢熱線: 400-166-8600 010-84118494 021-64186645 13811167915 咨詢QQ: 1580434811 咨詢QQ: 1258888686 客服郵箱:servicebj@viansaga.com 客服郵箱:servicesh@viansaga.com 聲明:本網站所有注明“來源:締一生物”的內容,版權均屬于北京締一生物網站所有,受到知識產權的法律保護。如需引用、轉載,須注明來源及原文鏈接。如內容涉及實質性修改,須來電獲取書面授權,且轉載時,須注明“來源:締一生物”。 最終解釋權歸締一生物所有。 下一篇: 差價巨大!這些血清到底有什么秘密?
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