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血清滅活之爭?一篇答疑解惑!血清使用小技巧(二)

2021-09-23 11:08來源:威正翔禹|締一生物

關于血清滅活的問題由來已久。很多同學找到我們,詢問血清到底要不要滅活如何滅活的問題。今天,就在這里跟大家好好嘮嘮,關于血清滅活的那些事。


一、血清滅活指的是什么?


一般情況下,血清的滅活就是將解凍后的血清(還不知道血清該怎樣解凍?快來戳戳這里有詳細講解:血清使用小技巧 | 如何保證血清活性?解凍和儲存方法很重要!,通過水浴加熱的方式來處理,達到滅活補體的目的,溫度和時間控制在如下范圍:


56℃加熱30分鐘

40℃加熱20分鐘


因此,買到手的血清究竟要不要滅活,主要考慮血清中的補體對于細胞培養以及后續實驗是否產生影響。下面就來簡單講講,補體與細胞培養的關系。



二、補體對細胞培養的影響?


補體是一種血清蛋白質,存在于人和脊椎動物血清及組織液中,不耐熱,可組成龐大的補體系統,可介導免疫應答和炎癥反應。激活的補體參與溶解細胞過程,刺激平滑肌收縮、細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。

因此,如果你的實驗涉及以下這些情況時,建議去除血清可能帶來的補體系統的干擾


1

免疫學研究

2

誘導胚胎干細胞分化

3

利用昆蟲細胞研究病毒感染

4

培養平滑肌細胞

5

其他補體參與的細胞培養過程


血清的**工作溫度一般是在37℃左右,所以熱滅火對于血清而言,也是一種不小的傷害,會導致一些營養成分流失,進而影響細胞狀態。


那么,市面上的血清都含有補體嗎?都需要進行熱滅活嗎?隨著研究的深入,網上也有一些人表示,胎牛血清無需熱滅活,這究竟是真是假?接下來就給大家揭示其中奧秘。



三、血清滅活疑云?


首先我們要明晰一點,按照牛發育情況,大體上,血清可以分為胎牛血清、新生牛血清、小牛血清和成牛血清。

其中,正規的胎牛血清,要求對5-8月胎齡(一般牛在10個月左右足月,后自然分娩)的胎牛采用心臟穿刺的方法采血,隨后進行其他制備步驟,得到胎牛血清。因此:


靠譜的胎牛血清

沒有形成一個完整的補體系統,不會真正地干預免疫!


所以,網傳的正規胎牛血清無需熱滅活的說法,是正確的,正常使用即可。



四、特殊情況


但有一點需要注意,如果你的實驗涉及到一些其他特殊的神秘活性物質,必須要滅活,根據血清廠家多年來總結的經驗,常規解凍后,40℃水浴加熱20分鐘即可,能夠**程度地保留營養成分。


今天的血清使用小技巧的分享到這里就結束了,希望能給各位老師同學帶來一點點幫助。



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