德國Minerva公司生產的Mynox支原體祛除劑是市面上惟一的支原體殺除劑,而其他牌子的支原體清除劑只是對支原體產生抑制作用,并無殺滅效果,因此作用很慢。本文威正翔禹/締一生物為您分析使用Mynox殺支原體應注意什么?
Mynox起效時間卻只有2-3個小時。但在使用Mynox過程中,還需要注意一些問題,以保證**的使用效果。
1、Mynox加入的細胞量要控制。Mynox每管200μl,是加入到2ml包含1x104-1x105細胞的培養(yǎng)液中。
2、細胞要注意打散為單細胞,不要讓細胞成團。因為Mynox需要與支原體直接接觸才能發(fā)揮效力。細胞成團容易造成細胞間隙,從而成為支原體的藏身之所。
3、Mynox與支原體污染的細胞的混合2個小時,即能完成支原體的殺滅。這時應換新鮮的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),不必再用Mynox。但這時不應馬上用PCR檢測支原體,因支原體雖然死亡,但培養(yǎng)液中還游離很多支原體DNA。應等傳代三至四次后,再進行檢測。
4、如果想延長Mynox作用時間至數天(細胞一代時間),期間應觀察細胞狀態(tài)。必要時換為標準培養(yǎng)基,或將Mynox與培養(yǎng)基按1:5稀釋培養(yǎng)。
5、如果使用Mynox消除污染細胞中的支原體,胎牛血清的**濃度為5%。過高濃度的血清會影響Mynox消除支原體的效果。如果使用Mynox消除病毒中的支原體,建議使用無血清的培養(yǎng)基。
6、包被病毒外層的脂質膜成分與支原體膜相似,也是Mynox結合的對象。根據使用Mynox的濃度和作用時間,這些病毒極易被Mynox殺除。為了能夠徹底殺除支原體同時保證病毒的繼續(xù)培養(yǎng),起始病毒滴度應高于106TCID50。
另外,或許有人疑問,Mynox只能殺滅細胞外的支原體,而對細胞內的支原體不起作用。這里需要澄清一下。事實上,細胞培養(yǎng)中產生的支原體污染就是細胞外的污染。只有一種支原體能進入到細胞內,就是Mycoplasma penetrans,但它并不污染體外培養(yǎng)的細胞。
綜上所述,您是不是已經對使用Mynox殺支原體應注意什么,有所了解。如果還有其他疑問,請咨詢威正翔禹/締一生物資深專家免費熱線:400-166-8600。