細胞培養中“低調的高手”——馬血清

說起細胞培養用的血清，大多數人都會想到胎牛血清、新生牛血清，對于馬血清卻知之甚少。今天就給大家介紹一下血清中“低調的高手”——馬血清。

一、馬血清作用

細胞培養級的馬血清，經過多次過濾，去除了許多大分子蛋白，但保留了血清中促細胞生長的活性因子，表現出與胎牛血清和牛血清的類似的特性，因而能用于細胞培養。

馬血清可以刺激成纖維細胞分化，以及細胞外基質 (ECM) 、細胞因子的合成。另外培養神經細胞和心肌細胞、誘導生成樹突狀細胞等實驗均可用馬血清替代胎牛血清。

因此，馬血清通常適用于那些研究有絲分裂后，細胞關于生長因子和激素等問題的實驗。或許，我們可以這樣說，從現有研究來看，馬血清更適合用來研究特定種類細胞的分化。

實際實驗應用方面：馬血清已被用作腦皮質神經元-膠質細胞培養的一種必添加物；大鼠的 PC12 細胞，在培養過程中，也需要在基礎培養基中添加馬血清作為補充劑。

1. 馬血清可用于細胞培養和干細胞的誘導分化，例如：

（1）RPMI-1640培養液加馬血清培養臍帶血單個核細胞。

（參考文獻：李春莉, 王建偉, 姜蓉, et al. 人參總皂苷誘導紅系血細胞增殖的信號轉導[J]. 中國組織工程研究, 2009(23):4568-4572.）

（2）原代培養神經細胞。有人用含10%馬血清的DMEM，分離培養BALB/c小鼠原代腦神經細胞。發現和添加2%神經細胞生長劑B27的Neurobasal培養基相比，含10%馬血清的DMEM培養基更節省成本，方便廉價。

（參考文獻：李丹, 呂耀中, 王微,等. 兩種培養基分離培養BALB/c小鼠原代神經細胞方法的比較[C]// 中國北方實驗動物科技年會. 遼寧省實驗動物學會, 2015.）

（3）誘導脂肪干細胞向成肌細胞分化

（文獻來源：劉杰,傅強.馬血清在脂肪干細胞成肌誘導中的作用[J].中國組織工程研究, 15(14)）

（4）培養骨髓基質細胞。與胎牛血清相比，馬血清對小鼠骨髓基質細胞的促增殖作用更好。

（文獻來源：王改琴. 當歸多糖對小鼠骨髓基質細胞黏附分子表達及其黏附功能的影響[D]. 學位論文.重慶醫科大學, 2008.）

（5）添加20%馬血清的L-DMEM培養液可誘導人骨髓間充質干細胞分化為脂肪細胞。

（文獻來源：趙文靜，陳亞潔，劉薇.人骨髓間充質干細胞分離培養及生物學特性研究.中國現代醫學雜志.2006.16(18):2744-2747）

2. 馬血清添加到微生物培養基中，可用于培養微生物，如：

（1）馬血清添加到培養基中用于支原體的培養。在《獸藥典》中，含馬血清的支原體培養基被用于獸用疫苗的支原體檢查。用KM2培養基(含馬血清)還可培養豬肺炎支原體。

（文獻來源：胡茂志 焦新安,等.豬肺炎霉形體單克隆抗體的制備與鑒定.《中國獸醫科技》 2004年12期）

（2）馬血清加入到固體和液體培養基中，可用于培養幽門螺桿菌。并且，和羊血清和牛血清比較，添加馬血清的培養基更易于分裝和保存。

（文獻來源：劉琳娜, 丁士剛, 張靜,等. 幾種培養幽門螺桿菌方法的比較[J]. 胃腸病學, 2012, 017(004):240-241.）

3. 馬血清及激素可共同誘導建立家兔股骨頭缺血壞死的模型。

（文獻來源：洪嵩, 張天宏. 非創傷性股骨頭壞死模型的血液流變學及脂質代謝[C]// 2009**屆貴州骨科論壇.）

二、注意事項

與胎牛血清一樣，馬血清在使用過程中也應注意幾個原則：

1、避免反復凍融；

2、三步法解凍，及時分裝；

3、配制好的完全培養基在4℃儲存不要超過7天。

還有一個大家比較關心的問題，馬血清是否需要滅活？

我們都知道，胎牛血清由于特殊的采血時間（5-8月胎齡），牛胚胎體內還沒有形成完整的補體系統，因而不需要采用熱滅活的手段對補體進行滅活。

而馬血清，在沒有特殊說明的情況下，一般采自成年馬匹。作為脊椎動物，成年馬也擁有完整的補體系統。

因而，如果所進行的實驗中，涉及補體相關內容，建議大家在使用前對馬血清進行熱滅活，也可以直接購買商品化的滅活馬血清。一些比較成功的實驗案例中，所用到的馬血清，也是經過熱滅活的。

相關實驗請參考：

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5111218/