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用數(shù)據(jù)證明,胎牛血清依舊是“金標(biāo)準(zhǔn)”

2022-08-11 16:59來源:締一生物

關(guān)于胎牛血清的爭論


胎牛血清(FBS)長期以來一直是哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)充劑的黃金標(biāo)準(zhǔn),廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué),而細(xì)胞生物則是疫苗、抗體、細(xì)胞信使RNA和各類細(xì)胞療法的基礎(chǔ)。


但有關(guān)胎牛血清的使用,一直都存在爭議

添加胎牛血清(FBS)用于生產(chǎn)細(xì)胞衍生藥物產(chǎn)品的安全問題引發(fā)了人們對替代胎牛血清的呼吁。


有科研人員建議用合理的替代生長補(bǔ)充劑來生長人類細(xì)胞而不是FBS。人類血小板裂解物已經(jīng)用于干細(xì)胞擴(kuò)增,但如何**地獲取這些裂解物還存在問題;一些以血清為基礎(chǔ)的胎牛血清替代品已經(jīng)取得了一些良好的結(jié)果,但這些替代品仍然是以動物為基礎(chǔ)的。


進(jìn)一步的研究表明,雖然一些人類干細(xì)胞可以通過一些胎牛血清替代療法在體外維持一段時間,但也有研究提到:與胎牛血清相比,血清替代法在支持多能干細(xì)胞擴(kuò)增和分化方面的能力較弱。


那么,胎牛血清究竟能否被替代?


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血清 VS 各類替代物


此前,有人對FBS的用以下四個替代品進(jìn)行了比較:


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(價格為2018年美國本土購買價格,不包含運(yùn)費(fèi)稅費(fèi)成本及其他相關(guān)費(fèi)用)


研究人員先用含有10%FBS的培養(yǎng)基中培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞系(C2BBe1)和神經(jīng)元細(xì)胞系(SH-SY5Y),在細(xì)胞接近匯合時,進(jìn)行劃痕實(shí)驗(yàn),在接下來的25天內(nèi)逐步將FBS替換為上述替代品。然后然后對細(xì)胞進(jìn)行染色、計(jì)數(shù)并比較細(xì)胞活力、細(xì)胞遷移和以及立體生長情況。


那么實(shí)驗(yàn)結(jié)果是怎樣的呢?


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與含10%FBS相比,C2BBe1細(xì)胞系根本無法在10%替代物C中正常增殖,但在10%替代物B?或10%替代物D中卻生長良好。


使用SH-SY5Y細(xì)胞,只有替代物B才能達(dá)到FBS的功效。SH-SY5Y細(xì)胞在這些替代物中的生長、增殖狀況,均低于11種不同品牌的FBS(陽性對照)


即便是由血小板衍生的替代物D在非FBS生長補(bǔ)劑中效果相對較好,似乎是**的,但也僅是使細(xì)胞增殖,而不能誘導(dǎo)細(xì)胞生長為立體的球狀。與FBS相比,細(xì)胞的生長也仍然較慢


總結(jié)


三類FBS替代品:


  1. 無血清和無異種物質(zhì),化學(xué)成分明確:替代物C;

  2. 人血小板裂解液:替代物D;

  3. 兩種混合純化生長因子的新生牛血清產(chǎn)品:替代物A、替代物B。

其中替代物C對實(shí)驗(yàn)所用到的細(xì)胞系的效果最差。替代物B和替代物D效果相對較好,至少與FBS培養(yǎng)條件下,內(nèi)皮細(xì)胞系的性能接近(在細(xì)胞傳代2周的情況下)。但這兩種非FBS生長補(bǔ)充劑在第3周的第3次細(xì)胞傳代時也出現(xiàn)了問題。


因此,該研究可看出,F(xiàn)BS目前還沒有找到完美的替代品,大多數(shù)細(xì)胞生物研究的黃金標(biāo)準(zhǔn)營養(yǎng)添加物仍然是胎牛血清。


參考文獻(xiàn):

Human Cells Grown With or Without Substitutes for Fetal Bovine Serum - John E. Piletz, Jennifer Drivon, John Eisenga, Will Buck, Sabrina Yen, Megan McLin, William Meruvia, Carolina Amaral, Kellie Brue, 2018 (sagepub.com)


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圖片


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