如何祛除「普通細(xì)胞」的支原體污染？

　　支原體

　　污染

　　細(xì)胞污染支原體，是令細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)從業(yè)者十分頭疼的問題。細(xì)胞感染了支原體又不愿丟棄怎么辦?本系列內(nèi)容分情況為大家解答。

　　01普通細(xì)胞支原體祛除

　　適用范圍

　　對于費(fèi)力擴(kuò)增的細(xì)胞(如已轉(zhuǎn)染，或經(jīng)過體外刺激)，如果細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有支原體污染，但此細(xì)胞又不愿丟棄，希望繼續(xù)培養(yǎng)，推薦使用MB公司生產(chǎn)的復(fù)合抗生素Zell Shield?。

　　02.Zell Shield?特點(diǎn)

　　·特點(diǎn)

　　高效廣譜：Zell Shield?通過阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過程中DNA及蛋白的合成，有效抑制上述微生物的增殖。

　　安全：無細(xì)胞毒性，采用復(fù)合支原體敏感抗生素，對大多數(shù)細(xì)胞株無毒。

　　活性穩(wěn)定：在細(xì)胞培養(yǎng)期間，Zell Shield?始終保持穩(wěn)定的活性。

　　使用方便：Zell Shield?為無菌溶液，可直接加入培養(yǎng)基使用。

　　03.Zell Shield?使用方法

　　使用方法

　　(1)在每次使用Zell Shield?之前，細(xì)胞傳代時(shí)，先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細(xì)胞，再使用加了Zell Shield?的培養(yǎng)基養(yǎng)細(xì)胞，能達(dá)到**的祛除支原體的效果。

　　(2)Zell Shield?常規(guī)為-18℃保存，建議使用前，先融化分裝，仍舊-18℃避光保存，使用時(shí)按需融化配置。避免反復(fù)凍融。

　　(3)Zell Shield?按1:100濃度可直接加入培養(yǎng)基。例如：500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield?，50mL/瓶的Zell Shield?可供5L培養(yǎng)基使用。

　　什么是懸浮沖洗法

　　據(jù)研究表明，約98%的支原體存在于細(xì)胞表面和細(xì)胞間隙。細(xì)胞傳代時(shí)，用干凈的PBS反復(fù)懸浮沖洗，就能把70%以上的支原體沖下來。

　　支原體直徑在180~350nm之間，遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于細(xì)胞直徑。通過低速離心，很容易將細(xì)胞和支原體分離，棄上清即可祛除大部分支原體。

　　簡要步驟

　　消化細(xì)胞

　　?

　　離心

　　?

　　棄上清

　　?

　　PBS清洗細(xì)胞

　　?

　　低速離心棄上清

　　重復(fù)清洗3次

　　?

　　加入含有Zell Shield?的

　　新鮮培養(yǎng)基

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