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細胞培養實驗前期準備工作內容2023-09-20 15:35
細胞實驗前期的準備很重要,有計劃的準備和了解細胞實驗過程,才能把細胞養好。下面詳細說說細胞實驗前期需要準備的事項: 1、準備無菌環境 千里之堤潰于蟻穴,細菌、真菌、支原體等微生物的生長速度塊和破壞力強,會破壞細胞結構,影響實驗結果。使用紫外線照射、定期用專用試劑進行實驗室清潔等,都有助于降低細胞污染的風險。 2、了解細胞的生長習性 不同的細胞生長習性不同。如成纖維細胞是貼壁生長,有一定的密度依賴性,密度小可能會出現不增殖,狀態差的情況,接種密度大時則需要隔天傳代,頻繁傳代則影響細胞狀態;再如RPMI-8226人多發性骨髓瘤細胞,是懸浮生長的,傳代需離心棄去上清即可。總之,了解細胞生長習性,再加上正確的計數,才能掌握好傳代的密度。 3、選擇正確的培養基 在養細胞之前,就要了解,你所養細胞的來源以及種類和名稱。 選擇正規途徑來源的細胞,索取細胞培養條件,并查閱文獻,確定所需培養液種類以及是否需要添加特殊成分,常用的細胞培養液有DMEM、RPMI1640、F12等等,一些常見的細胞基本可以使用這幾種培養基中的一種來培養,有的需要加入一定其他成分,這需要根據不同的細胞類型,查ATCC細胞庫或者查文獻,才能找到所需**培養液。選擇正確的培養液是養好細胞的**步。 4、選擇優質的血清 血清中含有細胞生長所必須的生長因子,作為哺乳動物細胞培養的附加物,血清的添加是十分重要的,因此,選擇優質的血清,是細胞培養成功與否的關鍵!Ausbian進口胎牛血清,內毒素含量低,澳洲血源,全程冷鏈運輸,為細胞培養保駕護航。 |