PCR實(shí)驗(yàn)室防核酸污染清除方法

導(dǎo)致PCR實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)假陽(yáng)性、結(jié)果不可信、研發(fā)不可靠的重要因素就是DNA氣溶膠污染，PCR 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)將防污染作為日常管理、實(shí)驗(yàn)安排、清潔消毒、實(shí)驗(yàn)習(xí)慣的核心。PCR 實(shí)驗(yàn)污染和細(xì)胞污染是有差別的，PCR 實(shí)驗(yàn)污染主要是核酸而不是細(xì)菌和其他入侵者。因此所有的預(yù)防措施都會(huì)稍稍有所不同。今天給大家介紹一下 PCR 實(shí)驗(yàn)室的主要污染來(lái)源、實(shí)驗(yàn)中如何避免和減少污染的可能性及PCR實(shí)驗(yàn)室防核酸污染清除方法。

1、樣本間交叉污染
收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴(yán)外溢；不同樣本移液時(shí)忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖；移液器等實(shí)驗(yàn)器具及耗材未及時(shí)消毒滅菌；不同樣本同時(shí)開(kāi)蓋或樣本劇烈震蕩、反復(fù)吹吸導(dǎo)致氣溶膠形成擴(kuò)散，相互交叉污染。

2、實(shí)驗(yàn)試劑污染

主要是在 PCR 組分試劑加樣過(guò)程中，由于移液器、容器、陰性對(duì)照及其它試劑被核酸模板或陽(yáng)性對(duì)照污染。 加樣過(guò)程中，因?yàn)?PCR 試劑對(duì)溫度十分敏感，需要通過(guò)冰浴使得 PCR 試劑和 PCR 板 / 管處于 0℃，但這個(gè)過(guò)程也是充滿了污染的風(fēng)險(xiǎn)的。

3、擴(kuò)增產(chǎn)物污染
大量拷貝的產(chǎn)物泄漏或擴(kuò)增后的 PCR 反應(yīng)管意外開(kāi)蓋，這是 PCR 反應(yīng)中最主要最常見(jiàn)的污染問(wèn)題。因?yàn)?PCR 產(chǎn)物拷貝量大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于 PCR 檢測(cè)數(shù)個(gè)拷貝的極限，所以極微量的 PCR 產(chǎn)物污染，就可形成假陽(yáng)性。

4、克隆質(zhì)粒污染作為陽(yáng)性質(zhì)控品的克隆質(zhì)粒外溢。

北京締一生物科技有限公司國(guó)內(nèi)總代理的 德國(guó)MB 產(chǎn)品 PCR Clean   PCR 核酸污染祛除噴霧劑(帶噴嘴)

在PCR實(shí)驗(yàn)室中，DNA污染很難徹底清除。即使只有一個(gè)污染的DNA分子被檢測(cè)到，也會(huì)使整個(gè)PCR檢測(cè)過(guò)程出現(xiàn)誤差。

為確保PCR試驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確，預(yù)防DNA或RNA交叉污染，PCR實(shí)驗(yàn)室大多會(huì)常備DNA/RNA污染清除劑。

核酸污染祛除噴霧劑特點(diǎn)

1.可有效地降解大多數(shù)表面上（輕質(zhì)金屬或有色金屬除外）的擴(kuò)增子，質(zhì)粒或基因組DNA和RNA。該產(chǎn)品還能有效地去除DNA酶和RNA酶。     

2.可直接使用。

3.保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員，避免接觸DNA污染。

4.非堿性，無(wú)致癌性，成分安全。

PCR Clean?核酸污染祛除噴霧劑使用方法

1.將PCR Clean?噴在操作臺(tái)表面，反應(yīng)1分鐘后，即可用干凈紙巾擦干試劑。注意：如果沒(méi)有擦拭干凈，液體揮發(fā)后表面可能有白色殘留，影響美觀。此時(shí)可用噴壺噴灑蒸餾水到白色殘留處，然后擦拭即可。

2.對(duì)于移液器要祛除DNA/RNA污染時(shí)，請(qǐng)按照說(shuō)明書(shū)拆開(kāi)移液器，將移液器桿軸浸泡在PCR Clean?噴霧劑中，1分鐘后取出后用水沖洗，晾干，重新組合。

3.將PCR Clean?桶裝，可用于補(bǔ)充到噴霧劑瓶中，或用于潔凈間地板等大面積清除DNA/RNA污染。