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什么是Taq酶切割探針

2024-05-06 16:25

Taq酶切割探針是指在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，Taq聚合酶（也稱為Taq酶）在鏈延伸時(shí)遇到與模板結(jié)合的TaqMan探針時(shí)，利用其5'→3'外切核酸酶活性將探針切斷的過(guò)程。

TaqMan探針是一種雙標(biāo)記的寡核苷酸探針，包括一個(gè)熒光素和一個(gè)熒光淬滅素。在探針完整時(shí)，熒光素和熒光淬滅素被緊密連接，導(dǎo)致熒光素所發(fā)出的熒光能量被淬滅素吸收，儀器檢測(cè)不到熒光信號(hào)。然而，當(dāng)Taq酶在鏈延伸過(guò)程中遇到與模板結(jié)合的探針時(shí)，其5'→3'外切核酸酶活性會(huì)將探針切斷，使熒光素和熒光淬滅素分離，從而釋放出熒光信號(hào)。

通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)這些熒光信號(hào)的累積，可以準(zhǔn)確地確定靶標(biāo)DNA序列的存在與數(shù)量。這種技術(shù)具有高特異性和靈敏度，在基因診斷和個(gè)體化用藥分析等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。