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加了支原體清除劑還可以用PCR測支原體嗎

2024-05-15 16:43

支原體對細胞有危害。支原體對細胞的影響是多方面的,主要可以從兩個方面來考慮:直接影響:細胞被支原體污染后,可能增殖緩慢,部分細胞變圓并從培養瓶壁脫落。有些細胞雖然表面變化不十分明顯,但實際上可能潛伏著多方面的危險。

間接影響:支原體可以通過消耗培養基中的精氨酸,抑制細胞DNA、RNA的合成,降低細胞的抵抗力。此外,支原體感染還會對細胞的代謝、免疫或生化特性、生長狀況、酶的作用途徑、細胞膜的組成、染色體結構、轉染效率以及細胞存活等多方面產生影響。

因此,支原體污染總是會影響研究的發現,并可能浪費大量的科研經費。支原體污染除了來源于其他污染的細胞外,大多數來自于實驗室操作人員,因為很多支原體在人體是正常菌群,稍有不慎就可能帶入實驗室而污染細胞。為了預防和控制支原體污染,實驗室需要采取嚴格的消毒和清潔措施,并定期檢測細胞培養物是否受到污染。

因此推薦使用,針對支原體起作用的支原體清除試劑——Mynox? Gold

Mynox? Gold代表了經典Mynox?試劑的進一步發展,將抗生素和生物試劑與生物物理作用模式相結合,從而盡可能殺滅細胞中的支原體。

與其他細菌細胞相比,支原體沒有細胞壁,但被質膜包圍。Mynox? Gold中含有的生物試劑可整合到支原體膜中,并損害其完整性。由于這種聯合配方,生物試劑和抗生素的有效劑量可以降低到最低的細胞毒性,同時仍然可靠和明確地消除支原體。

支原體去除處理后,不應直接使用基于PCR的檢測方法。Mynox? Gold溶解支原體顆粒,隨后將支原體DNA釋放到培養基中。然后可以通過PCR檢測到游離DNA,導致假陽性結果。

Mynox? Gold的效果,受反應混合物中脂質和蛋白質濃度的影響,例如,培養基補充劑的成分,如胎牛血清(FCS)。這些成分競爭性地結合Mynox? Gold中所含的生物試劑,并防止其與支原體膜結合。因此,我們建議,在細胞培養基中使用5% v/v FCS進行。由于血清蛋白和脂質成分的抑制作用,目前還沒有針對高蛋白和脂質濃度生物制劑的治療方案。

細胞培養基的類型不影響處理的效率??股?,特別是在需要選擇的情況下,可以在治療混合物中使用。