支原體qPCR檢測試劑盒 探針法

支原體檢測試劑盒（探針法）是一種用于確定如細胞庫、病毒種子、臨床治療用途的細胞和生物制品中是否存在支原體污染的檢測工具。以下是關于該試劑盒的詳細信息：

一、產品概述

品牌：德國Minerva-Biolabs?
供應商：北京締一生物/上海威正翔禹

產品名稱：qPCR Kit(經典法) Venor?Gem qEP

型號：11-9025、11-9100、11-9250

價格：根據規格不同，價格有所差異

保質期：1年6個月

保存條件：2~8℃保存至少12個月。復溶后-18℃以下保存。

二、支原體qPCR檢測試劑盒特點

1.內控對照為獨立包裝，遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

2.高特異性，一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種（包括歐洲藥典規定的9種支原體）。與細菌和真核DNA無交叉反應。

3.高靈敏度，最低檢測限可達到≤10CFU/ml。

4.相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA，便于特異性驗證。

5.有相應配套的支原體絕對定量標準品，便于最后定量檢測。

三、操作步驟

第1步：樣本處理

a.細胞培養上清

b. 生物藥或需遵循藥典的樣本

說明：①樣品基質可能會影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測定靈敏度。

    ②細胞培養物樣本含豐富的DNA酶，在低溫下也能降解支原DNA，影響檢測靈敏度。

建議：樣本做DNA抽提處理，實現最高靈敏度。

推薦：德國MB公司生產的專用支原體DNA提取試劑盒

Venor? Gem Sample Preparation Kit

該DNA抽提試劑盒已經過廣泛驗證。

第2步：試劑制備

a.凍干粉溶解

b. 反應體系制備

b1) 樣品為細胞上清篩查——反應體系制備

b2) 樣品為生物藥——反應體系制備

第3步：啟動熒光定量PCR儀

第4步：結果判別

FAM通道：檢測支原體熒光信號。HEX通道：檢測內控對照熒光信號。

支原體DNA和內控DNA存在信號的競爭性抑制。

支原體DNA越多，FAM通道信號越高，檢測內控對照的HEX通道信號越低。

定量需基于Ct值和DNA標準曲線。

Ct＜40為陽性結果。Ct≥40為陰性結果。

示意圖：

四、使用建議

本產品僅作科研用途。

建議使用德國Miverva Biolabs公司的支原體DNA提取試劑盒，通過對DNA的提取，來提高檢測的準確率。。

操作時應遵循說明書，規范操作，注意安全和健康。

支原體qPCR檢測試劑盒（探針法）為科研人員提供了一種高效、準確、可靠的支原體檢測方法，有助于在科研工作中及時發現和處理支原體污染，提高科研效率。