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細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室如何預(yù)防支原體污染?2024-07-18 15:46
在拿到細(xì)胞到開始培養(yǎng)的過程中,預(yù)防支原體污染應(yīng)注意以下幾點(diǎn): 1.新購產(chǎn)品檢測 新到的細(xì)胞、培養(yǎng)基、血清都可以做一下簡單的污染檢測后再開始實(shí)驗(yàn)。另外要注意每次試劑量配制不宜過多,建議分裝使用,分裝時(shí)用針頭濾器過濾一次。 2.控制環(huán)境污染 要保證實(shí)驗(yàn)室和培養(yǎng)箱的潔凈,按時(shí)殺菌,可以用酒精擦拭和紫外照射的方法。必要時(shí)可以通臭氧過夜。 3.嚴(yán)格無菌操作 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時(shí)一定要按照實(shí)驗(yàn)室的要求,確保無菌操作。感冒咳嗽時(shí)盡量不要使用細(xì)胞房,如果必須使用,請?jiān)趯?shí)驗(yàn)后徹底清潔消毒使用空間。準(zhǔn)備好細(xì)胞房專業(yè)潔凈衣,戴好口罩和手套。 所有進(jìn)超凈臺的物品**都用酒精擦拭一遍,超凈臺里面的東西一定要盡量少放,東西太多會(huì)影響超凈臺內(nèi)空氣流通及空氣除菌細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌; 4.最小化抗生素使用頻率 非珍貴細(xì)胞污染直接丟棄,避免抗生素濫用導(dǎo)致抗藥性產(chǎn)生。 支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。 支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如內(nèi)酰胺類、萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性、常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些氟喹諾酮。 支原體污染在細(xì)胞培養(yǎng)中實(shí)際上是比較常見的, 據(jù)資料, 可達(dá)30%甚至更高。支原體污染時(shí)細(xì)胞表現(xiàn)為長得不好,也不死亡, 同時(shí), 培養(yǎng)基又是清亮的。時(shí)間長達(dá)一周也沒有什么變化。這時(shí)基本上可以判斷出是支原體污染了, 愿意檢測就檢測一下,不愿意直接用清除試劑處理。 避免細(xì)胞污染,可以從預(yù)防著手,超凈工作臺物品放置要合理、進(jìn)入細(xì)胞房要換鞋,穿實(shí)驗(yàn)服,實(shí)驗(yàn)員戴手套后要用酒精消毒、避免細(xì)胞交叉污染等。 上一篇: 支原體污染的來源和對細(xì)胞的影響
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