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支原體PCR絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品
Quantification Standards DNA
符合歐洲藥典（EP）和日本藥典（JP）要求的支原體檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品。歐洲藥典第2.6.7章(EP 2.6.7)和日本藥典(第17版)第G3章(JP G3)描述了基于NAT（核酸擴(kuò)增檢測(cè)的英文簡(jiǎn)稱，包括PCR/qPCR）的支原體檢測(cè)。如果用NAT法替代培養(yǎng)法檢測(cè)支原體時(shí)，則要求顯示每毫升樣品體積(CFU/ml)中10個(gè)菌落形成單位的檢測(cè)，即靈敏度需達(dá)到10CFU/ml。
支原體PCR絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品適用范圍：
基于以上檢測(cè)要求，在質(zhì)量控制和符合 EP 2.6.7 的檢測(cè)背景下，還對(duì) PCR 檢測(cè)的特異性和測(cè)試靈敏度進(jìn)行檢驗(yàn)，以符合標(biāo)準(zhǔn)。德國(guó)Minerva Biolabs公司的支原體PCR絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品（PCR Quantification Standards）可在以上條件下，對(duì)qPCR實(shí)驗(yàn)的靈敏度和特異性進(jìn)行檢測(cè)。
PCR絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品含所選微生物物種的純的、定量的基因組DNA。該產(chǎn)品被設(shè)計(jì)為輔助定量PCR分析的工具。因此，除方法驗(yàn)證外，支原體PCR定量標(biāo)準(zhǔn)品（PCR Quantification Standards）也適用于常規(guī)PCR和qPCR的指定微生物基因組的標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：每一種PCR定量標(biāo)準(zhǔn)品均可通過連續(xù)稀釋產(chǎn)生特定微生物的基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線。
支原體PCR絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品可提供以下產(chǎn)品內(nèi)容：
1、藥典 EP第2.6.7章中所列出的所有10種支原體菌株。
定量標(biāo)準(zhǔn)品DNA所屬物種 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
口腔支原體 | 52-0112 | 1×108 基因組DNA/管 + 緩沖液2ml/管×3管/盒 | 詢價(jià) |
雞敗血支原體 | 52-0115 | 詢價(jià) |
萊氏無(wú)膽甾原體 | 52-0116 | 詢價(jià) |
發(fā)酵支原體 | 52-0117 | 詢價(jià) |
肺炎支原體 | 52-0119 | 詢價(jià) |
關(guān)節(jié)液支原體 | 52-0124 | 詢價(jià) |
精氨酸支原體 | 52-0129 | 詢價(jià) |
豬鼻支原體 | 52-0130 | 詢價(jià) |
檸檬螺原體 | 52-0164 | 詢價(jià) |
唾液支原體 | 52-0103 | 詢價(jià) |
百日咳桿菌 | 52-5571 | 詢價(jià) |
大腸埃希菌 | 52-0083 | 詢價(jià) |
肺炎軍團(tuán)菌 | 52-0101 | 詢價(jià) |
銅綠假單胞菌 | 52-0071 | 詢價(jià) |
2、額外有：Pseudomonas aeruginosa（Cat. No. 52-0071）、Bordetella pertussis（Cat. No. 52-5571）、Escherichia coli（Cat. No. 52-0083）、Legionella pneumophila（Cat. No. 52-0101）這幾種菌株的定量標(biāo)準(zhǔn)品可供選購(gòu)。
3、從特定微生物中提取的基因組DNA，培養(yǎng)傳代次數(shù)較低，用于生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)品的微生物在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，并在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)階段結(jié)束時(shí)收獲。
4、使用標(biāo)準(zhǔn)化方法分析DNA起始材料，以確定DNA的完整性和數(shù)量。
5、只有純的、完整的、在瓊脂糖凝膠中顯示> 10 kb 條帶的、且OD 260/280 > 1.8的DNA可用于產(chǎn)品生產(chǎn)。
6、從每個(gè)培養(yǎng)中分離DNA，通過熒光分析定量，最后稀釋以調(diào)整最終濃度(每瓶1 × 10^8個(gè)基因組拷貝)。
7、每種微生物的身份通過Sanger測(cè)序確認(rèn)，針對(duì)基因組中的物種特定區(qū)域。凍干PCR定量標(biāo)準(zhǔn)品，提高產(chǎn)品穩(wěn)定性。
支原體PCR絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶操作
1.標(biāo)準(zhǔn)品短時(shí)離心，以收集凍干粉至管底。
2.取試劑盒提供的Tris緩沖液（白蓋）100 μl，加入到標(biāo)準(zhǔn)品管內(nèi)（綠蓋）。
3.室溫下靜置5分鐘。
4.渦旋混合10秒鐘，離心5秒鐘。
5.選合適體積的復(fù)溶DNA用于PCR擴(kuò)增或梯度稀釋，以制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。
多種可選的產(chǎn)品類別
? 符合藥典要求的10CFU/100CFU支原體檢測(cè)滅活標(biāo)準(zhǔn)品：
10 CFU? Mycoplasma Sensitivity Standards
100 CFU? Mycoplasma Sensitivity Standards
? 濃度經(jīng)滴度測(cè)定的純化支原體基因組DNA：
Genomic DNA extracts
效期及儲(chǔ)存條件：
每個(gè)產(chǎn)品上都注明了到期日期。
未開封的試劑盒應(yīng)儲(chǔ)存在+2至+8°C。
(締一生物)
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