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預(yù)防和清除支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)方法

2016-10-09 12:47
文章附圖

提高無(wú)菌操作技術(shù)

在實(shí)驗(yàn)室中,熟練的技術(shù)人員應(yīng)細(xì)心監(jiān)督新來(lái)人員是否遵循無(wú)菌操作的規(guī)范,這可以幫助減少支原體污染的風(fēng)險(xiǎn)。強(qiáng)烈建議對(duì)所有細(xì)胞污染事故要進(jìn)行記錄和存檔,以解決污染問(wèn)題。

  檢查培養(yǎng)基是否污染

由于支原體污染的主要來(lái)源之一是從實(shí)驗(yàn)室外帶進(jìn)來(lái)的細(xì)胞,建議使用可靠的細(xì)胞庫(kù)提供的細(xì)胞。

如果存在應(yīng)當(dāng)隔離的支原體污染的細(xì)胞,而沒(méi)有單獨(dú)的細(xì)胞培養(yǎng)箱的情況下,在隔離期內(nèi),應(yīng)使用有蓋的塑料細(xì)胞培養(yǎng)瓶。不要使用培養(yǎng)板和未密封的培養(yǎng)皿。對(duì)懷疑有污染的培養(yǎng)的細(xì)胞,應(yīng)在每天所有其他細(xì)胞培養(yǎng)工作結(jié)束后再對(duì)它進(jìn)行處理。應(yīng)使用單獨(dú)分裝的培養(yǎng)基和試劑。強(qiáng)烈建議完工后要對(duì)生物安全柜進(jìn)行消毒。

合理使用抗生素

用于細(xì)胞培養(yǎng)的理想的抗生素應(yīng)能消除所有的污染物,對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)毒,而不干擾實(shí)驗(yàn),但沒(méi)有一種抗生素能滿足以上所有的標(biāo)準(zhǔn)。因此,用于細(xì)胞培養(yǎng)的抗生素應(yīng)有限制。相反的,一個(gè)良好的無(wú)菌操作對(duì)于預(yù)防污染起著更重要的作用。

細(xì)胞培養(yǎng)中的微生物污染是可以通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)基的混濁或顏色變化檢測(cè)到。在細(xì)胞培養(yǎng)中使用抗生素的情況下,有四種可能:

1.對(duì)抗生素敏感。

2.對(duì)抗生素耐藥。

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