預防和清除支原體污染的細胞培養方法

3.對抗生素部分耐藥。

4.只有支原體對抗生素耐藥。

最后一種情況是最差的，因為支原體可以通過氣溶膠傳播。在抗生素敏感的情況下，抗生素能防止細菌和真菌繁殖，但從一開始就沒有能力預防支原體。因此，在細胞培養中長時間連續使用抗生素，不僅是沒有幫助的，而且也會引起很多的問題。然而，在原代培養中，短期（前兩周）使用抗生素（青霉素/鏈霉素），是至關重要的。因為抗生素在培養基中不穩定，強烈建議每隔兩三天進行一次換液。

丟棄或治療支原體污染的細胞

如果被支原體污染的細胞較為珍貴或稀少，建議進行清除支原體的治療。否則，建議丟棄支原體污染的細胞，因為它們被認為是實驗室污染的來源。

被污染的細胞應該丟棄，以避免成為污染源。但對于珍貴的細胞，可使用Minerva Biolabs公司的Mynox Gold?支原體清除劑。Mynox Gold?支原體清除劑是市面上一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌，可與支原體膜特異性結合，破壞膜通透性，導致支原體膨脹破裂而死。使用Mynox?一般在2-3個小時即可完成清除任務。

隔離任何來源的新細胞

正如前面章節中描述，從其他實驗室帶來的新細胞是污染的主要來源。因此，在新細胞作任何用途之前，有必要隔離細胞，并檢查是否有支原體污染。

減少氣溶膠的產生

在生物安全柜或細胞培養箱中細胞操作產生的氣溶膠，以及人員自身產生的氣溶膠，在實驗室中都會傳播支原體污染。因此，避免產生氣溶膠的活動有助于預防細胞培養中的支原體污染。

支原體檢查的重要性

根據一些報告，在美國和歐洲，正在培養的細胞或細胞庫凍存的細胞中，支原體污染的幾率大約是15%至35%。因此，經常進行支原體檢查是非常必要的。

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英文原文：

Methods for prevention of mycoplasma contamination in cell culture

Improve aseptic techniques and practices

A precise supervision of new workers in the lab by a skilled operator to follow good aseptic techniques can help to reduce the risk of mycoplasma contamination. It is highly recommended to prepare the reports of all cell contamination incidents to solve the problem of contamination .

Test cultures for contamination