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非發酵菌的種類與鑒定試驗2018-12-13 10:57來源:締一生物
非發酵菌是指一群不能發酵葡萄糖或僅能以氧化形式利用葡萄糖的革蘭氏陰性桿菌。部分非發酵菌在臨床上具有致病性,為機會致病菌。近年來此類細菌從住院病人的痰、尿、血液、體液標本中的分離率日漸增高。 分類與命名: 主要的非發酵G-桿菌屬被分成6個科: 假單胞菌科:根據rRNA-DNA同源性分為5個rRNA群 ①rRNAⅠ群/假單胞菌屬; ②rRNAⅡ群/伯克霍爾德菌屬; ③rRNAⅢ群/叢毛單胞菌屬、食酸菌屬; ④rRNAⅣ群/短波毛單胞菌屬; ⑤rRNAⅤ群/窄食單胞菌屬; ⑥其它:鞘氨醇單胞菌屬、希瓦菌屬等 產堿桿菌科:產堿桿菌屬; 黃桿菌科:華麗桿菌屬 莫拉菌科:不動桿菌屬、莫拉菌屬; 甲基球菌科; 根瘤菌科。 非發酵菌的基本鑒定要求 缺少糖發酵的證據,通常是在KIA或TSI培養基中無酸產生,斜面和底部均呈紅色。 氧化酶+(不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌、唐菖蒲伯克菌、淺黃華麗單胞菌、棲稻黃素單胞菌-),但并非所有氧化酶+的G-桿菌都是非發酵菌。 麥康凱上生長很差或不生長。 動力:多為+,但多為專性需氧,故半固體培養基中不明顯,宜用直接動力觀察或染色法。 重要的鑒定試驗 葡萄糖利用(O/F試驗):O/F培養基:蛋白胨和糖類的比例為1:5而不同于發酵菌的1:2。 氧化酶試驗:細胞色素氧化酶的產生與否鑒別分類 氧化酶試驗陽性的非發酵菌主要有:假單胞菌屬、伯克霍爾德菌、無色桿菌屬、希瓦氏菌屬、 黃桿菌屬、莫拉菌屬等。 氧化酶試驗陰性的非發酵菌主要有:不動桿菌屬、窄食單胞菌等。 (3)動力:半固體培養基:應只穿刺培養基頂部4 mm,在培養4-6小時后觀察結果,24和48小時后再次觀察結果。更準確的方法是濕片法和鞭毛染色。 (4)色素形成:非發酵菌可形成多種色素,有助于菌種的鑒定。 (5)硝酸鹽還原/產氣:將硝酸鹽還原成亞硝酸鹽,進而釋放氮的生化過程。 (6)吲哚試驗:需用含色氨酸豐富的培養基,產吲哚黃桿菌、腦膜敗血黃桿菌、食酸叢毛單胞菌等。 (7)硫化氫:腐敗希瓦菌是非發酵菌中**在KIA和TSI上產硫化氫的菌種。 非發酵菌的鑒定程序復雜,種類繁多,締一生物為您推薦一款快速鑒定非發酵菌的產品——由國際上,HiMedia公司生產的HiBio-ID?微生物生化鑒定試劑卡(盒)——非發酵菌鑒定試劑盒(貨號:KB019) KB019是全面的非發酵菌標準顯色鑒定系統。非發酵菌屬于革蘭氏陰性,不生芽孢,多分離自臨床樣本。該試劑盒用于尿、胃腸道等臨床標本,也可用于實驗室已擁有的菌株鑒定。它包含12種傳統生化試驗和12種糖發酵試驗,通過微生物代謝反應導致培養基顏色變化。 該試劑盒包含兩個生化試劑卡,可一次性進行多種生理生化實驗,主要包括的實驗有: 鑒定卡1
鑒定卡2
待鑒定菌種應先進行分離和純化。可在營養瓊脂(MV001/MV1274)或腦心浸膏瓊脂(MV211)上挑取一個菌落,接種在5ml腦心浸膏肉湯中,35-37℃培養4-6小時,直到在620nm處,接種液濁度≥0.1OD或0.5 McFarland標準。 無菌打開試劑盒,撕掉封條。每孔接種50μl上述菌液。也可用接種環劃線。35℃-37℃孵育24-48小時后,按說明書操作。 締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養和檢測領域,會一如既往地為您帶來優質的服務。如需詳細了解更多信息可訪問公司官網:http://www.klyyp.com/ ;咨詢電話:400-166-8600。 下一篇: 非發酵菌的感染特征及鑒定方法
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