產品目錄
  • 細胞培養進口血清
    進口胎牛血清
    進口新生牛血清
    進口豬血清
    馬血清
  • 支原體檢測盒及標準品
    常規PCR檢測試劑盒
    熒光定量PCR檢測(qPCR法)
    支原體DNA提取
    靈敏度標準品(方法驗證用)
    特異性標準品(方法驗證用)
    PCR定量標準品(可用于方法驗證)
  • 支原體祛除試劑
    細胞中支原體祛除
    環境支原體祛除
    水槽支原體祛除
  • 干細胞培養基
  • DNA/RNA污染祛除
    DNA/RNA污染祛除試劑
    DNA污染監測
  • RNA病毒研究試劑
    RNA病毒檢測試劑盒
    病毒RNA提取
  • PCR儀器及配套產品
    DNA污染監測祛除
    PCR/qPCR儀性能檢查
    PCR試劑
    PCR試劑盒
    PCR預混液(凍干粉)
    熱啟動聚合酶MB Taq DNA
  • 微生物PCR檢測
    食品檢測類產品
    食品微生物檢測
    細菌PCR檢測
歡迎來到 威正翔禹|締一生物官方網站|咨詢熱線:400-166-8600
咨詢熱線
400-166-8600

產品目錄
  • 細胞培養進口血清
    進口胎牛血清
    進口新生牛血清
    進口豬血清
    馬血清
  • 支原體檢測盒及標準品
    常規PCR檢測試劑盒
    熒光定量PCR檢測(qPCR法)
    支原體DNA提取
    靈敏度標準品(方法驗證用)
    特異性標準品(方法驗證用)
    PCR定量標準品(可用于方法驗證)
  • 支原體祛除試劑
    細胞中支原體祛除
    環境支原體祛除
    水槽支原體祛除
  • 干細胞培養基
  • DNA/RNA污染祛除
    DNA/RNA污染祛除試劑
    DNA污染監測
  • RNA病毒研究試劑
    RNA病毒檢測試劑盒
    病毒RNA提取
  • PCR儀器及配套產品
    DNA污染監測祛除
    PCR/qPCR儀性能檢查
    PCR試劑
    PCR試劑盒
    PCR預混液(凍干粉)
    熱啟動聚合酶MB Taq DNA
  • 微生物PCR檢測
    食品檢測類產品
    食品微生物檢測
    細菌PCR檢測

M 199培養基的改良可使疫苗增產

2019-03-28 14:18來源:締一生物


M199是經典的細胞培養基,也常作為疫苗生產用的培養液,用于地鼠腎細胞、原代雞胚細胞、Vero細胞的大規模培養。這其中,也添加有新生牛血清,水解乳蛋白等。


近年有文獻報道,改良的M199比經典的M199的效果更好1。但具體的改良配方并未透露,只提到調整了氨基酸等營養成分的配比。因此,如果在不升高成本的情況下,改用改進后的M199培養基,會帶來更好的細胞培養效果和經濟效益。


在現有培養基中,SFRE199是值得關注的,它恰好是M199的改良型。它的改進方面主要為:1、升高了葡萄糖和8種氨基酸(精氨酸-鹽酸、半胱氨酸、胱氨酸、L -谷氨酰胺、L -谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、酪氨酸)的濃度,使其達到促進細胞的**活力,而又不產生毒性;2、加入了硫酸鋅、丙酮酸鈉和魚精蛋白鋅胰島素。3、降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。4、加入了半乳糖。實驗發現,半乳糖可使細胞培養液中的乳酸降低54%3,使pH保持穩定。


SFRE199最初是用于原代狒狒腎細胞的培養3,后來也有用于牛輸卵管峽部上皮細胞和壺腹上皮細胞的培養。其特點是,都只用了SFRE199,而沒有添加血清,細胞的培養效果仍然理想。值得注意的是,原代細胞較細胞系難培養,因此,SFRE199中升高的氨基酸和葡萄糖濃度,顯然更有利于原代細胞的生長。同時,上述細胞都屬于泌尿生殖系細胞。Vero細胞、地鼠腎細胞與上述細胞的起源相同,可以想見,SFRE199也同樣非常有可能適用于這些疫苗生產細胞的培養。事實上,國外在1992年時即有報道3,用SFRE199作為化學限定培養基的一部分,用于Vero細胞的靜置培養和懸浮培養,只不過還添加了BSA和血清替代物等,并且發現,SFRE199培養的效果**。而在實際應用中,用SFRE199替代M199,同時降低牛血清的用量,也是非常有可能的,從而降低生產成本。


在SFRE199對M199的改進中,值得注意的是添加了硫酸鋅和胰島素。有研究者發現,如果在SFRE199中去除這2個成分,則細胞二倍分裂時間延長,細胞不能很快長滿,若含有這2種成分,則該培養基支持生長的能力相當于標準對照血清培養基3。


因此,如果疫苗生產企業目前用的培養液是M199,則推薦更換為SFRE199,因為生產成本沒有增加,而細胞生長和病毒滴度卻可有一個理想的結果。



參考文獻


1. 陳嘉雯,等. 改良M199培養基在Vero細胞培養中的適用性. 中國生物制品學雜志. 2014, 27(1): 76-77


2. 吳長安. 無血清化學限定培養基對原代細胞的培養及其對病毒的敏感性?!秶忉t學.生物制品分冊》. 1981年04期


3. Jack Litwin. The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. Cytotecnology 10:169-174,1992