內(nèi)毒素對(duì)細(xì)胞的危害到底有多大？

我們常說(shuō)，細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，在選購(gòu)血清的時(shí)候，一定要看檢測(cè)報(bào)告，關(guān)注上面一些很重要的指標(biāo)。比如病毒、內(nèi)毒素這些。

不難理解，血清中如果有病毒存在，不僅細(xì)胞養(yǎng)不好，實(shí)驗(yàn)人員的安全也會(huì)受到威脅。

那這血清中內(nèi)毒素的高低對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)會(huì)有啥影響啊？為什么選血清要選內(nèi)毒素含量低的呢？

所以今天我們就來(lái)聊聊，細(xì)胞培養(yǎng)中血清的內(nèi)毒素問(wèn)題。

人體對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素極為敏感。

極微量（1-5ng/kg，而1ng≈2.5EU）內(nèi)毒素就能引起體溫上升，發(fā)熱反應(yīng)持續(xù)約4小時(shí)后逐漸消退。

自然感染時(shí)，因革蘭氏陰性菌不斷生長(zhǎng)繁殖，同時(shí)伴有陸續(xù)死亡、釋出內(nèi)毒素，故發(fā)熱反應(yīng)將持續(xù)至體內(nèi)病原菌完全消滅為止。

內(nèi)毒素引起發(fā)熱反應(yīng)的原因是內(nèi)毒素作用于體內(nèi)的巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等，使之產(chǎn)生IL-1、IL-6和TNF-α等細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子作用于宿主下丘腦的體溫調(diào)節(jié)中樞，促使體溫升高發(fā)熱。

由于內(nèi)毒素是細(xì)菌死亡裂解或自溶引起的，因此環(huán)境中大量存在內(nèi)毒素。但是如果在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，出現(xiàn)了大量?jī)?nèi)毒素，可不是一件好事。

此前，有人做過(guò)實(shí)驗(yàn)，來(lái)觀察內(nèi)毒素對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響，記錄的影響包括：刺激白細(xì)胞培養(yǎng)物產(chǎn)生組織因子、激活鼠巨噬細(xì)胞，以及通過(guò)極低水平（低于 1 ng/mL）的內(nèi)毒素抑制鼠類紅細(xì)胞集落形成等一系列指標(biāo)。

隨后，發(fā)表了許多關(guān)于內(nèi)毒素對(duì)體外細(xì)胞功能和生長(zhǎng)影響的論文。

Morris等人發(fā)現(xiàn)（1），只需暴露 6 小時(shí)，低至 0.5 ng/mL 的內(nèi)毒素水平可以顯著增加馬腹膜巨噬細(xì)胞中IL-6的產(chǎn)生。Mattern等人發(fā)現(xiàn)（2）， 100 ng/mL 內(nèi)毒素可以刺激人類 T 細(xì)胞的增殖及其淋巴因子的產(chǎn)生，但這種刺激需要與先前暴露于內(nèi)毒素的單核細(xì)胞直接物理接觸。Sibley等人報(bào)道，10 到 200 ng/mL 內(nèi)毒素刺激鼠 B 細(xì)胞腫瘤細(xì)胞系 (70Z/3) 完成 IgM 的產(chǎn)生，然后在細(xì)胞表面表達(dá)（3）。

基于上述證據(jù)，很明顯，內(nèi)毒素對(duì)每種細(xì)胞的影響是不一樣。接下來(lái)我們就看看產(chǎn)生這些影響的機(jī)制有哪些。

關(guān)于內(nèi)毒素與細(xì)胞培養(yǎng)物相互作用的機(jī)制仍有很多未知（4，5，6，7）。

參考文獻(xiàn)：

1、Morris,D.D., Crowe, N., Moore, J.N.and Moldawer, L.L. Endotoxin-Induced Production ofInterleukin 6 by Equine Peritoneal Macrophages In Vitro. Am. J. Vet. Res.53:1298-1301 (1992).

2、Mattern, T.,Thanhauser, A., Reiling, N.,Toellner, K., Duchrow, M., Kusumoto, S.,Rietschel,E.T., Ernst, M., Brade, H.,Flad, H.D. and Ulmer, A.J. Endotoxin and Lipid A StimulateProliferation of Human T Cells In the Presence of Autologous Monocytes. J.Immunol. 153:2996-3004(1994).

3、Sibley, C.H.,Terry, A. and Raetz, C.R.H.Induction of K Light Chain Synthesis in 70Z/3 BLymphoma Cells by Chemically Defined Lipid A Precursors. J. Biol. Chem.263:5098-5103 (1988).

4、Morrison, D.C.,Dinarello, C.A., Munford,R.S., Natanson, C., Danner, R., Pollack,M., Spitzer,J.J., Ulevitch, R.J., Vogel,S.N., and McSweegan, E. Current Status of BacterialEndotoxins. ASM News,60:479-484 (1994).

5、Raetz, C.R.H.Biochemistry of Endotoxins.Annu. Rev. Biochem. 59:129-170 (1990).

6、Raetz,C.R.H. Bacterial Endotoxins:Extraordinary Lipids that Activate EucaryoticSignal Transduction. J. Bact.175:5745-5753 (1993).

7.、Raetz,C.R., Ulevitch, R.J., Wright, S.D.,Sibley, C.H., Ding, A., and Nathan, C.F. Gram-negativeEndotoxin: An Extraordinary Lipid with Profound Effects on Eukaryotic SignalTransduction. FASEB J. 5:2652-2660 (1991).

8、Risco, C.,Dominguez, J.E., Bosch, M.A.,and Carrascosa, J.L. Biochemical and

ElectronMicroscopy Analysis of the Endotoxin Binding to Microtubules in vitro. Mol.Cell. Biochem. 121:67-74(1993).

從現(xiàn)有的研究可以看出，內(nèi)毒素對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)影響還是很大的：

改變細(xì)胞外形

活化細(xì)胞，產(chǎn)生訊息傳遞物質(zhì)

抑制酶活性

抑制人工受精的成功率等

內(nèi)毒素過(guò)高，有事甚至?xí)苯痈淖兾覀兊膶?shí)驗(yàn)結(jié)果。所以要盡量避免內(nèi)毒素的干擾。

一般來(lái)說(shuō)，細(xì)胞或組織培養(yǎng)過(guò)程中內(nèi)毒素污染源通常來(lái)自于血清、培養(yǎng)液及外加藥物配制用水等。

所以選擇內(nèi)毒素含量低的血清就顯得尤為重要。

Ausbian品牌胎牛血清   獨(dú)特優(yōu)勢(shì)：

    1. 精選內(nèi)毒素更低批次（≤3EU/ml），原裝進(jìn)口。是細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目十幾年的穩(wěn)定供應(yīng)品牌。

    2. 新批次在試用前，提供試用服務(wù)，養(yǎng)細(xì)胞更放心。

    3. 每個(gè)批次產(chǎn)量800-2000升，試用滿意的實(shí)驗(yàn)室批號(hào)優(yōu)先鎖定，保證大多數(shù)項(xiàng)目?jī)赡瓴恍钃Q批次，細(xì)胞試驗(yàn)數(shù)據(jù)穩(wěn)定。

    4. 每年按廠家生產(chǎn)順序，會(huì)有多批次平行供應(yīng)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室專屬批號(hào)管理，保證供貨穩(wěn)定。

    5. 為Ausbian血清用戶免費(fèi)提供申報(bào)支持，具有完整的檢測(cè)報(bào)告，為各類項(xiàng)目的申報(bào)提供支持。（同時(shí)為血清VIP用戶在支原體檢測(cè)、方法學(xué)驗(yàn)證等方面，提供更多免費(fèi)延伸性技術(shù)幫助。）

    6. 針對(duì)特殊科研項(xiàng)目，可提供3-5個(gè)平行批次，讓試驗(yàn)人有更多選擇空間。

    7. 為Ausbian血清提供免費(fèi)代儲(chǔ)存服務(wù)，為儲(chǔ)存空間不足的實(shí)驗(yàn)室提供可靠的血清倉(cāng)儲(chǔ)保護(hù)，按要求隨時(shí)發(fā)貨。

    8. Ausbian血清從出廠，到實(shí)驗(yàn)室，全程低溫冷鏈保護(hù)，確保血清無(wú)反復(fù)凍融。

    9. 免費(fèi)真品保障，每個(gè)血清瓶身加貼Viansaga?易破損防偽標(biāo)簽，Ausbian品牌真品保護(hù)，逢假必究，為實(shí)驗(yàn)室做好售后保障。

    10. 免費(fèi)無(wú)憂售后，所有實(shí)驗(yàn)室簽收的Ausbian胎牛血清，從簽收日開(kāi)始計(jì)算，一年之內(nèi)，血清在妥善保管、未開(kāi)封未融化、且不影響二次銷售的情況下，均可享受無(wú)條件退貨或換貨的售后保障。

   11. 免費(fèi)專業(yè)幫助，匯集近二十年，千萬(wàn)個(gè)血清用戶細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，為各種細(xì)胞培養(yǎng)提供問(wèn)題梳理分析，解決方案參考。

聲明：本網(wǎng)站所有注明“來(lái)源：締一生物”的內(nèi)容，版權(quán)均屬于北京締一生物網(wǎng)站所有，受到知識(shí)產(chǎn)權(quán)的法律保護(hù)。如需引用、轉(zhuǎn)載，須注明來(lái)源及原文鏈接。如內(nèi)容涉及實(shí)質(zhì)性修改，須來(lái)電獲取書(shū)面授權(quán)，且轉(zhuǎn)載時(shí)，須注明“來(lái)源：締一生物”。

最終解釋權(quán)歸締一生物所有。