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細胞培養(yǎng)中的抗生素究竟是敵是友?2021-10-29 09:10來源:威正翔禹|締一生物
提到配制細胞培養(yǎng)基,你能想到啥? 營養(yǎng)成分和緩沖體系多數(shù)情況下都是必要的,但這抗生素,真的是必要的嗎?有了抗生素,細胞就無懼污染了嗎? 關于抗生素在細胞培養(yǎng)過程中的意義,一直都有很矛盾,不用細胞容易污染,一直用對細胞狀態(tài)也會有影響,到底該怎么辦?今天我們就來一探究竟。 抗生素對細胞的影響 很多同學養(yǎng)細胞的手藝,都是從師兄師姐那里「傳承」來的,由于沒有辦法做到絕對的無菌,所以從經(jīng)驗角度出發(fā),前輩們都會告訴剛開始養(yǎng)細胞的同學,可以在配制培養(yǎng)基的時候,加入1%左右的雙抗,防止細胞出現(xiàn)細菌污染(有些時候甚至出現(xiàn)離開抗生素,細胞沒過幾天立馬就被污染的情況)。 這就造成一些小伙伴在培養(yǎng)基中「預防性添加抗生素」,其實圖的就是個心安,抱著「有了抗生素就不怕污染」的心態(tài)。但事實上,抗生素并不是「免死**」,真菌、支原體這些污染是它不能夠對抗的,甚至濫用還會適得其反。 這抗生素對細胞有什么影響呢? 早在十幾年前,就有很多報導指出β-內(nèi)酰胺類抗生素及氨基糖甙類抗生素,對真核細胞培養(yǎng)有抑制增殖作用[1]。并且這種抑制增殖作用在原代細胞和干細胞等難養(yǎng)細胞上尤其明顯[2-3]。2017年,加州大學Nadav Ahituv博士在Scientific Reports上發(fā)表文章,呼吁在細胞培養(yǎng)過程中減少抗生素的使用[4]。他們發(fā)現(xiàn)抗生素(雙抗:青霉素和鏈霉素)的使用影響人體肝細胞中基因表達與基因調控。其中有209個基因的表達發(fā)生了改變,特別是與藥物和應激反應相關的基因。超過9,500個基因調控元件發(fā)生了變化,并且很多調節(jié)元件位于參與細胞分化,核酸酶活性和tRNA修飾的基因附近。雖然這些基因的數(shù)量在龐大的細胞基因庫中不值一提,但這絕對不是一個應該被忽略的事件。 雖然抗生素對真核細胞生長的影響機制至今尚未明確,但是為了細胞更好的生長,實驗結果更加準確,實驗數(shù)據(jù)更加穩(wěn)定,在實驗過程中盡量不要隨意使用。 參考文獻: [1] KA Neftel, Hubscher, U. Effects of beta-lactam antibiotics on proliferating eucaryotic cells.[J]. Antimicrobial Agents & Chemotherapy, 1987, 31(11):1657-61. [2] Varghese D S , Parween S , Ardah M T , et al. Effects of Aminoglycoside Antibiotics on Human Embryonic Stem Cell Viability during Differentiation In Vitro[J]. Stem Cells Int, 2017, 2017:1-18. [3] Nygaard U H , Niehues H , Rikken G , et al. Antibiotics in cell culture: friend or foe? Suppression of keratinocyte growth and differentiation in monolayer cultures and 3D skin models[J]. Experimental Dermatology, 2016, 24(12):964-965. [4] Ryu A H , Eckalbar W L , Kreimer A , et al. Use antibiotics in cell culture with caution: genome-wide identification of antibiotic-induced changes in gene expression and regulation[J]. Scientific Reports, 2017, 7(1):7533. 如何有效避免污染? 抗生素對細胞有一定傷害,但是不加抗生素又要怎樣避免實驗出現(xiàn)污染的狀況呢? 1、實驗環(huán)境(包括培養(yǎng)箱內(nèi)部、冰箱、超凈臺)要進行定期徹底的消毒,用消毒液(75%乙醇溶液、新潔爾滅等)擦拭地面墻面桌面等地方,不留衛(wèi)生死角;紫外線照射30分鐘以上。 2、定期用支原體祛除試劑清潔超凈臺臺、桌面等地方。 點擊下方圖片了解更多商品詳情 3、培養(yǎng)箱、水浴鍋的水槽要定期清潔,用支原體預防試劑處理。 4、細胞房實驗要用專用的實驗服:進入細胞房正式實驗前須換上專用防護服、專用鞋或鞋套。 5、實驗廢料不在細胞房堆積,及時清理。 6、遵照細胞實驗操作方法,實驗過程中嚴格無菌操作。 另外,選擇一款合格的實驗試劑也很重要。就拿血清來說,合格的血清產(chǎn)品,一定要有明確的檢測報告,指出微生物檢測情況。 以Ausbian血清為例:各項指標均符合要求。 1. 精選內(nèi)毒素更低批次(≤3EU/ml),原裝進口。是細胞典藏等重大項目十幾年的穩(wěn)定供應品牌。 2. 新批次在試用前,提供試用服務,養(yǎng)細胞更放心。 3. 每個批次產(chǎn)量800-2000升,試用滿意的實驗室批號優(yōu)先鎖定,保證大多數(shù)項目兩年不需換批次,細胞試驗數(shù)據(jù)穩(wěn)定。 4. 每年按廠家生產(chǎn)順序,會有多批次平行供應,每個實驗室專屬批號管理,保證供貨穩(wěn)定。 所有血清出廠前,均經(jīng)過嚴格質控,每個批次附有詳細完整的《檢測報告》,包括:品名,貨號,批號,血源地,生產(chǎn)日期,保質期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無菌檢查(細菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細胞病變效應等)、促細胞生長能力、細胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。 5. 為Ausbian血清用戶免費提供申報支持,具有完整的檢測報告,為各類項目的申報提供支持。(同時為血清VIP用戶在支原體檢測、方法學驗證等方面,提供更多免費延伸性技術幫助。) 6. 針對特殊科研項目,可提供3-5個平行批次,讓試驗人有更多選擇空間。 7. 為Ausbian血清提供免費代儲存服務,為儲存空間不足的實驗室提供可靠的血清倉儲保護,按要求隨時發(fā)貨。 8. Ausbian血清從出廠,到實驗室,全程低溫冷鏈保護,確保血清無反復凍融。 9. 免費真品保障,每個血清瓶身加貼Viansaga?易破損防偽標簽,Ausbian品牌真品保護,逢假必究,為實驗室做好售后保障。 10. 免費無憂售后,所有實驗室簽收的Ausbian胎牛血清,從簽收日開始計算,一年之內(nèi),血清在妥善保管、未開封未融化、且不影響二次銷售的情況下,均可享受無條件退貨或換貨的售后保障。 11. 免費專業(yè)幫助,匯集近二十年,千萬個血清用戶細胞培養(yǎng)經(jīng)驗,為各種細胞培養(yǎng)提供問題梳理分析,解決方案參考。 點擊下方圖片了解更多商品詳情 如果你對本公司產(chǎn)品感興趣,想要了解更多,歡迎訪問 北京締一生物官網(wǎng):www.dyshengwu.com 或聯(lián)系北京締一生物公司 咨詢熱線: 400-166-8600 010-84118494 021-64186645 13811167915 咨詢QQ: 1580434811 咨詢QQ: 1258888686 客服郵箱:servicebj@viansaga.com 客服郵箱:servicesh@viansaga.com 聲明:本網(wǎng)站所有注明“來源:締一生物”的內(nèi)容,版權均屬于北京締一生物網(wǎng)站所有,受到知識產(chǎn)權的法律保護。如需引用、轉載,須注明來源及原文鏈接。如內(nèi)容涉及實質性修改,須來電獲取書面授權,且轉載時,須注明“來源:締一生物”。 最終解釋權歸締一生物所有。 上一篇: 本月特價(11月1-30日)
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