產品目錄
  • 細胞培養進口血清
    進口胎牛血清
    進口新生牛血清
    進口豬血清
    馬血清
  • 支原體檢測盒及標準品
    常規PCR檢測試劑盒
    熒光定量PCR檢測(qPCR法)
    支原體DNA提取
    靈敏度標準品(方法驗證用)
    特異性標準品(方法驗證用)
    PCR定量標準品(可用于方法驗證)
  • 支原體祛除試劑
    細胞中支原體祛除
    環境支原體祛除
    水槽支原體祛除
  • 干細胞培養基
  • DNA/RNA污染祛除
    DNA/RNA污染祛除試劑
    DNA污染監測
  • RNA病毒研究試劑
    RNA病毒檢測試劑盒
    病毒RNA提取
  • PCR儀器及配套產品
    DNA污染監測祛除
    PCR/qPCR儀性能檢查
    PCR試劑
    PCR試劑盒
    PCR預混液(凍干粉)
    熱啟動聚合酶MB Taq DNA
  • 微生物PCR檢測
    食品檢測類產品
    食品微生物檢測
    細菌PCR檢測
歡迎來到 威正翔禹|締一生物官方網站|咨詢熱線:400-166-8600
咨詢熱線
400-166-8600

產品目錄
  • 細胞培養進口血清
    進口胎牛血清
    進口新生牛血清
    進口豬血清
    馬血清
  • 支原體檢測盒及標準品
    常規PCR檢測試劑盒
    熒光定量PCR檢測(qPCR法)
    支原體DNA提取
    靈敏度標準品(方法驗證用)
    特異性標準品(方法驗證用)
    PCR定量標準品(可用于方法驗證)
  • 支原體祛除試劑
    細胞中支原體祛除
    環境支原體祛除
    水槽支原體祛除
  • 干細胞培養基
  • DNA/RNA污染祛除
    DNA/RNA污染祛除試劑
    DNA污染監測
  • RNA病毒研究試劑
    RNA病毒檢測試劑盒
    病毒RNA提取
  • PCR儀器及配套產品
    DNA污染監測祛除
    PCR/qPCR儀性能檢查
    PCR試劑
    PCR試劑盒
    PCR預混液(凍干粉)
    熱啟動聚合酶MB Taq DNA
  • 微生物PCR檢測
    食品檢測類產品
    食品微生物檢測
    細菌PCR檢測

干貨分享:細胞轉染全攻略(中)

2022-05-27 18:40來源:威正翔禹|締一生物

圖片

- 優質血清助力細胞學實驗 -

圖片

上期內容里,我們介紹了細胞轉染的基本基本知識,包括概念、應用場景以及各種方法之間的優劣對比。


本期內容,進一步為大家介紹常用的細胞轉染方法——實操篇。

- 細胞轉染常用方法 -

圖片

陽離子脂質體介導的轉染


原理:陽離子脂質體介導的轉染是目前最常用的轉染方式之一。

陽離子脂質的基本結構由帶正電荷的頭基和一個或兩個烴鏈組成。

圖片

帶正電荷的頭基與帶負電荷的核酸通過靜電作用形成復合物。

圖片


經細胞的內吞作用進入細胞。

圖片

實驗過程:將DNA,RNA,siRNA或寡核苷酸和轉染試劑分別在不同的管中稀釋→將兩者混合形成混合物→將形成的混合物加入細胞中,脂質體的正電荷有助于幫助復合物粘附到細胞膜上→復合物經細胞內吞作用進入細胞→檢測基因表達或沉默情況。

磷酸鈣共沉淀


原理:將DNA與氯化鈣在磷酸緩沖鹽水中混合形成磷酸鈣-DNA沉淀物,然后將其分散在培養的細胞上,磷酸鈣促進共沉淀物中的縮合DNA與細胞表面的結合,DNA通過內吞作用進入細胞。


實驗過程:將氯化鈣和DNA混合,以可控的方式加入磷酸緩沖液→在室溫下孵育,以形成極細,可溶的共沉淀微粒→將磷酸鈣-DNA沉淀物加入細胞中,后者能黏附到細胞膜表面→共沉淀物經細胞內吞作用進入細胞→檢測基因表達或沉默情況。

病毒轉染


原理:對于用脂質體不能實現轉染的細胞,可以采用病毒轉染。腺病毒,逆轉錄病毒和慢病毒載體已廣泛用于哺乳動物細胞體內外的基因轉染。

圖片

實驗過程:通過基因克隆方法獲得重組病毒表達載體→轉染包裝細胞系,擴增并分離得到重組病毒顆粒→純化并滴定病毒液→轉導目的細胞(含有病毒特異性的受體)→從培養基中移除病毒→檢測基因表達或沉默情況。


電轉


原理:利用電脈沖在細胞膜上形成暫時的孔使核酸物質能穿過孔進入細胞。


實驗過程:利用電轉緩沖液重懸細胞→對含有核酸,緩沖液,細胞的混合物給予合適的電脈沖→電脈沖在細胞膜上形成電勢差,誘導產生暫時的孔使核酸進入細胞→將細胞返回到生長培養基中,使其慢慢恢復→檢測基因表達或沉默情況。

血清在細胞培養過程中的重要性不言而喻:


  • 提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。

  • 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調節它們所結合的物質活力。

  • 有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。

  • 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。

  • 起酸堿度緩沖液作用。

  • 提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

  • 參與細胞凍存。

    ......


一款優質的血清,絕對能成為細胞實驗的“最強輔助”。


Ausbian進口特級胎牛血清與市面上其他品牌血清相比,有獨特優勢:

圖片


1. 精選內毒素更低批次(≤3EU/ml),原裝進口。是細胞典藏等重大項目十幾年的穩定供應品牌。

2. 新批次在試用前,提供試用服務,養細胞更放心。

3. 每個批次產量800-2000升,試用滿意的實驗室批號優先鎖定,保證大多數項目兩年不需換批次,細胞試驗數據穩定。

4. 每年按廠家生產順序,會有多批次平行供應,每個實驗室專屬批號管理,保證供貨穩定。

5. 為Ausbian血清用戶免費提供申報支持,具有完整的檢測報告,為各類項目的申報提供支持。(同時為血清VIP用戶在支原體檢測、方法學驗證等方面,提供更多免費延伸性技術幫助)。

6. 針對特殊科研項目,可提供3-5個平行批次,讓試驗人有更多選擇空間。

7. 為Ausbian血清提供免費代儲存服務,為儲存空間不足的實驗室提供可靠的血清倉儲保護,按要求隨時發貨。

8. Ausbian血清從出廠,到實驗室,全程低溫冷鏈保護,確保血清無反復凍融。

9. 免費真品保障,每個血清瓶身加貼Viansaga?易破損防偽標簽,Ausbian品牌真品保護,逢假必究,為實驗室做好售后保障。

10. 免費無憂售后,所有實驗室簽收的Ausbian胎牛血清,從簽收日開始計算,一年之內,血清在妥善保管、未開封未融化、且不影響二次銷售的情況下,均可享受無條件退貨或換貨的售后保障。

11. 免費專業幫助,匯集近二十年,千萬個血清用戶細胞培養經驗,為各種細胞培養提供問題梳理分析,解決方案參考。

12. Ausbian品牌擁有全系列血清產品線:

特級胎牛血清、細胞治療專用胎牛血清(貨號:WS500T(紅點)),透析胎牛血清 (貨號:VS500TZ   )等多系列產品,服務更專業更精準。


如果你對本公司產品感興趣,想要了解更多,歡迎訪問

北京締一生物官網:

www.dyshengwu.com

上海威正翔禹生物網站:

www.klyyp.com

或聯系北京締一生物公司

咨詢熱線:

400-166-8600

010-84118494

021-64186645

13811167915

咨詢QQ: 1580434811

咨詢QQ: 1258888686

客服郵箱:servicebj@viansaga.com

客服郵箱:servicesh@viansaga.com



聲明:本網站所有注明“來源:締一生物”的內容,版權均屬于北京締一生物網站所有,受到知識產權的法律保護。如需引用、轉載,須注明來源及原文鏈接。如內容涉及實質性修改,須來電獲取書面授權,且轉載時,須注明“來源:締一生物”。

最終解釋權歸締一生物所有。