產(chǎn)品目錄
  • 細胞培養(yǎng)進口血清
    進口胎牛血清
    進口新生牛血清
    進口豬血清
    馬血清
  • 支原體檢測盒及標準品
    常規(guī)PCR檢測試劑盒
    熒光定量PCR檢測(qPCR法)
    支原體DNA提取
    靈敏度標準品(方法驗證用)
    特異性標準品(方法驗證用)
    PCR定量標準品(可用于方法驗證)
  • 支原體祛除試劑
    細胞中支原體祛除
    環(huán)境支原體祛除
    水槽支原體祛除
  • 干細胞培養(yǎng)基
  • DNA/RNA污染祛除
    DNA/RNA污染祛除試劑
    DNA污染監(jiān)測
  • RNA病毒研究試劑
    RNA病毒檢測試劑盒
    病毒RNA提取
  • PCR儀器及配套產(chǎn)品
    DNA污染監(jiān)測祛除
    PCR/qPCR儀性能檢查
    PCR試劑
    PCR試劑盒
    PCR預混液(凍干粉)
    熱啟動聚合酶MB Taq DNA
  • 微生物PCR檢測
    食品檢測類產(chǎn)品
    食品微生物檢測
    細菌PCR檢測
歡迎來到 威正翔禹|締一生物官方網(wǎng)站|咨詢熱線:400-166-8600
咨詢熱線
400-166-8600

產(chǎn)品目錄
  • 細胞培養(yǎng)進口血清
    進口胎牛血清
    進口新生牛血清
    進口豬血清
    馬血清
  • 支原體檢測盒及標準品
    常規(guī)PCR檢測試劑盒
    熒光定量PCR檢測(qPCR法)
    支原體DNA提取
    靈敏度標準品(方法驗證用)
    特異性標準品(方法驗證用)
    PCR定量標準品(可用于方法驗證)
  • 支原體祛除試劑
    細胞中支原體祛除
    環(huán)境支原體祛除
    水槽支原體祛除
  • 干細胞培養(yǎng)基
  • DNA/RNA污染祛除
    DNA/RNA污染祛除試劑
    DNA污染監(jiān)測
  • RNA病毒研究試劑
    RNA病毒檢測試劑盒
    病毒RNA提取
  • PCR儀器及配套產(chǎn)品
    DNA污染監(jiān)測祛除
    PCR/qPCR儀性能檢查
    PCR試劑
    PCR試劑盒
    PCR預混液(凍干粉)
    熱啟動聚合酶MB Taq DNA
  • 微生物PCR檢測
    食品檢測類產(chǎn)品
    食品微生物檢測
    細菌PCR檢測

細菌基因組DNA的提取方法

2024-04-17 16:33

細菌基因組DNA的提取是一個重要的實驗步驟,常用于分子生物學、遺傳學等領(lǐng)域的研究。以下是幾種常用的細菌基因組DNA提取方法:

快速微量提取法:

取適量菌體培養(yǎng)物于滅菌的Ep管中,離心后收集菌體。

加入裂解液混勻,并在一定溫度下保溫一定時間,使菌體充分裂解。

通過離心和抽提步驟,去除雜質(zhì)并提取DNA

最后,通過沉淀、洗滌和干燥等步驟,得到純凈的細菌基因組DNA

水煮法:

刮取少量菌苔于一定體積的ddH2O中,煮沸一定時間。

離心后,基因組DNA即溶解在上清液中。

此方法操作簡便,但純度可能不夠高,且對細胞壁較厚的革蘭陽性菌的提取效果較差。

Chelex提取法:

與水煮法步驟基本相似,只是以Chelex提取液替代ddH2O

Chelex提取液能夠結(jié)合并去除雜質(zhì),從而提高DNA的純度。

堿裂解法:

使用含有NaOH和枸櫞酸鈉的堿裂解液處理菌體。

堿性環(huán)境能夠使菌體細胞壁破裂,釋放基因組DNA

通過后續(xù)步驟的離心和洗滌,可以得到純凈的DNA

超聲波法:

利用超聲波處理菌體懸液,使細胞急劇振蕩破裂。

這種方法能夠高效地破碎細胞壁,釋放基因組DNA

反復凍融法:

將制備的細菌懸液在低溫下冷凍,然后在室溫或更高溫度下溶解。

通過反復凍融,形成冰粒并引起細胞內(nèi)鹽濃度增高和細胞壁溶漲,從而使細胞結(jié)構(gòu)碎裂。

后續(xù)步驟與水煮法相似,用于提取基因組DNA

在提取過程中,需要注意一些關(guān)鍵事項,如盡量簡化操作步驟、縮短提取時間、減少化學和物理因素對核酸的降解,以及防止核酸的生物降解等。此外,對于DNA酶的抑制,可以通過加入金屬離子螯合劑或使用核酸酶抑制劑來實現(xiàn)。

總的來說,選擇合適的提取方法取決于實驗的具體需求和實驗條件。在實際操作中,建議根據(jù)實驗室的設備和經(jīng)驗選擇最適合的方法,并嚴格按照操作步驟進行,以確保提取的基因組DNA的質(zhì)量和純度。